酵母DNA的提取与相关试剂

酵母DNA的提取
1、x新鲜的菌体中加入150ul（200ul）bufferiI25(30)ul蜗牛酶（30mg/ml），37度，10Min（可以30min水浴，中间隔5分钟，振荡一次，避免细胞沉到管底。
2、离心10000rmp，10min，去上清，沉淀中加入bufferII250ul
3、加入25ul，10%SDS。65度，30min水浴。
4、加入25ul5mol/lKAC，冰浴60分钟（4度冰箱放置就可以）
5、12000rmp，15min，取上清，在上清中加入2-3倍体积的无水乙醇，混匀放置－20度一小时（可guo夜，取出后不要振荡，直接离心）
6、12000rmp，15min，弃上清。
7、50ul，bufferIII溶液沉淀，12000rmp，15min
8、将上清溶液转到干净的离心管中，加入6ul（10ug/ul），Ran酶，37度，30min
9、加入等体积异丙醇，4度静止10min，10000rmp，5min，溶于50ulbufferIII中
10、如果有蛋白质可以使用酚氯仿抽提
11、bufferI：0.9mol/l山梨醇，0.1mol/lEDTA
12、bufferII：50mmol/lTris，20mmol/lEDTA
13、bufferIII：10mmol/ltris，1mol/lEDTA
14、筛选AD/BD可以直接使用抗生素筛选的方法
15、酵母菌落PCR
北京索莱宝科技有限公司酵母ＲＮＡ提取相关试剂：
S8280   Snailase蜗牛酶   国产   1g
R8020   RNaseA核糖核酸酶A   Sigma   25mg
R8021   RNaseA核糖核酸酶A   国产   25mg
T8060   TRIS三羟甲基氨基甲烷   Sigma   500g
T8060   TRIS三羟甲基氨基甲烷   Sigma   1KG
B8160   Bis-Tris   fluka   5g
T8230   TRIS-HCl    Amresco   100g
S8090   D-Sorbitol D-山梨醇   Amresco   250g
S8090   D-Sorbitol D-山梨醇   Amresco   500g
P1011   提取试剂：25：24：1（PH<5.0）   solarbio   100ml/500ml
P1012   提取试剂：25：24：1（PH>7.8）   solarbio   100ml/500ml
T8660   Timentin特美汀（新型革兰氏阴性菌抗生素）   solarbio3.2g
更多产品信息请您咨询北京索莱宝科技有限公司ＱＱ：１０７９２７８２０８

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