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- 【导读】酵母DNA的提取1、x新鲜的菌体中加入150ul(200ul)bufferiI25(30)ul蜗牛酶(30mg/ml),37度,10Min(可以30min水浴,中间隔5分钟,振荡一...
酵母DNA的提取
1、x新鲜的菌体中加入150ul(200ul)bufferiI25(30)ul蜗牛酶(30mg/ml),37度,10Min(可以30min水浴,中间隔5分钟,振荡一次,避免细胞沉到管底。
2、离心10000rmp,10min,去上清,沉淀中加入bufferII250ul
3、加入25ul,10%SDS。65度,30min水浴。
4、加入25ul5mol/lKAC,冰浴60分钟(4度冰箱放置就可以)
5、12000rmp,15min,取上清,在上清中加入2-3倍体积的无水乙醇,混匀放置-20度一小时(可guo夜,取出后不要振荡,直接离心)
6、12000rmp,15min,弃上清。
7、50ul,bufferIII溶液沉淀,12000rmp,15min
8、将上清溶液转到干净的离心管中,加入6ul(10ug/ul),Ran酶,37度,30min
9、加入等体积异丙醇,4度静止10min,10000rmp,5min,溶于50ulbufferIII中
10、如果有蛋白质可以使用酚氯仿抽提
11、bufferI:0.9mol/l山梨醇,0.1mol/lEDTA
12、bufferII:50mmol/lTris,20mmol/lEDTA
13、bufferIII:10mmol/ltris,1mol/lEDTA
14、筛选AD/BD可以直接使用抗生素筛选的方法
15、酵母菌落PCR
北京索莱宝科技有限公司酵母RNA提取相关试剂:
S8280 Snailase蜗牛酶 国产 1g
R8020 RNaseA核糖核酸酶A Sigma 25mg
R8021 RNaseA核糖核酸酶A 国产 25mg
T8060 TRIS三羟甲基氨基甲烷 Sigma 500g
T8060 TRIS三羟甲基氨基甲烷 Sigma 1KG
B8160 Bis-Tris fluka 5g
T8230 TRIS-HCl Amresco 100g
S8090 D-Sorbitol D-山梨醇 Amresco 250g
S8090 D-Sorbitol D-山梨醇 Amresco 500g
P1011 提取试剂:25:24:1(PH<5.0) solarbio 100ml/500ml
P1012 提取试剂:25:24:1(PH>7.8) solarbio 100ml/500ml
T8660 Timentin特美汀(新型革兰氏阴性菌抗生素) solarbio3.2g
更多产品信息请您咨询北京索莱宝科技有限公司QQ:1079278208仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-08-14 09:23:08
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