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- 【导读】产品简介:采用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测双链DNA时,SYBRGreenⅠ是灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBRGre...
产品简介:
采用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测双链DNA时,SYBRGreenⅠ是灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBRGreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。由于与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。SYBRGreenⅠ的低检出限:20pgDNA(254nm);60pgDNA(300nm紫外透射)。此外,SYBRGreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1-2ng,300nm紫外透射),比EB灵敏20至100倍。
SYBRGreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。SYBRGreenⅠ用于琼脂糖凝胶电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。此外,SYBRGreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无YZ作用,可直接进行消化或连接。使用说明:
该产品使用方法同EB。
1.点染法:用于琼脂糖凝胶电泳,取原液1L加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1mL,再加入6×DNALoadingbuffer上样缓冲液1mL混匀,(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1-2L工作液和5L电泳样品混匀后静置5min后直接上样。
2.胶染法:常规配置琼脂糖凝胶100mL,加热至融化,待温度将至50-70℃(感觉不烫手)加入该原液10L。待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。
注意事项:
1.SYBRGreenⅠ应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装冻存,短期可以4℃保存。
2.胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNAmarker稀释5-10倍后使用。
3.在预染色方法中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBRGreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
4.在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBRGreenI可以全部从双链核酸上去掉。
5.在紫外照射透视下,与双链DNA接合的SYBRGreenI呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA则颜色为橘黄而不是绿色。
6.SYBRGreen对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。SY1020SYBRGreenI(10000×)
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