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- 【导读】 大鼠脂联素(ADP)elisa实验步骤本试剂盒仅供研究使用。检测范围: ...
大鼠脂联素(ADP)elisa实验步骤
本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T
3μg/L -120μg/L
大鼠脂联素(ADP)elisa实验步骤
使用目的:
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脂联素(ADP)水平。用纯化的大鼠脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素(ADP),再与HRP标记的脂联素(ADP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠脂联素(ADP)浓度。
试剂盒组成
130倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7终止液
6ml×1瓶
2酶标试剂
6ml×1瓶
8标准品(240μg/L)
0.5ml×1瓶
3酶标包被板
12孔×8条
9标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4样品稀释液
6ml×1瓶
10说明书
1份
5显色剂A液
6ml×1瓶
11封板膜
2张
6显色剂B液
6ml×1/瓶
12密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120μg/L
5号标准品
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
60μg/L
4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
30μg/L
3号标准品
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
15μg/L
2号标准品
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5μg/L
1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
大鼠脂联素(ADP)elisa实验步骤注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔diyi孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
- 2004-07-13 09:31:27
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