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- 【导读】即使蛋白酶对细胞功能很重要,但你也有不想见到它们的时候。比如,在纯化蛋白质的时候,你可不想让蛋白酶大肆吞噬你的目标蛋白吧,特别是低丰度蛋白。如今,市场上有多种蛋白酶抑制剂可供选择,...
即使蛋白酶对细胞功能很重要,但你也有不想见到它们的时候。比如,在纯化蛋白质的时候,你可不想让蛋白酶大肆吞噬你的目标蛋白吧,特别是低丰度蛋白。如今,市场上有多种蛋白酶YZ剂可供选择,帮助你在必要时停止蛋白酶的活性。
为了对付细胞和组织样品中存在的各种蛋白酶,YZ剂的选择也在不断增加。目前,主要有四种类型的蛋白酶,根据他们活性位点中的氨基酸命名:丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶。蛋白酶YZ剂可以特异针对一种蛋白酶,也可以是广谱的。
人们通常根据YZ剂作用的蛋白酶类型,以及它们可逆或不可逆,对蛋白酶YZ剂进行分类。如何选择和使用?这似乎是一个难题,光看名字就已经让人头晕了。下面让我们来听听专业人士的建议。
从鸡尾酒开始
蛋白酶YZ剂的选择,取决于每个用户的个性化实验,不过对于裂解细胞或匀浆组织的应用,YZ剂混合物(或者说鸡尾酒)通常是个比较保险的选择,可阻断不同的蛋白酶。AbbexaZ畅销的YZ剂就是两种混合物:ProteaseInhibitorCocktailMultipurpose以及Protease,Phosphatase&PMSF;这两者都适用于裂解液。“它们普遍适用,适合许多样品,无论是新鲜还是FFPE组织,抑或不同的物种,”Abbexa的经理SabrinaCalabressi谈道。
若研究人员希望保留目的蛋白,同时维持细胞健康,默克密理博的高级经理ChandraMohan也建议使用YZ剂混合物。她建议选择针对四种蛋白酶的YZ剂,如默克密理博的ProteaseInhibitorCocktailIII。它可YZ哺乳动物细胞和组织中的天冬氨酸、半胱氨酸和丝氨酸蛋白酶以及氨肽酶。
有时,不那么特异的YZ剂似乎是个更好的选择。“在裂解细胞或制备组织匀浆液时,Z好使用具有广谱特异性的YZ剂,”Mohan说。“它们应当快速反应,与蛋白酶不可逆结合,并在蛋白纯化后轻松去除。”
尽管如此,选择困难症还是围绕着你。Abbexa认为,尝试不同的类型是供应商的责任,而不是研究人员的。这家公司建议你和供应商交流,让他们将利用自己的专业知识来帮你选择。通常,Abbexa在了解研究人员的特定分析、样品类型和应用之后,才推荐Z佳的YZ剂。
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