不同产地牛大力水提物中总黄酮、总皂苷及总多糖的含量测定-仪器网

不同产地牛大力水提物中总黄酮、总皂苷及总多糖的含量测定

来源：上海美析仪器有限公司分类：操作使用 2024-09-13 10:00:10 0阅读次数

第一部分:引言

牛大力为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤MillettiaspeciosaChamp.的干燥块根，药食两用，广泛分布于广东、广西、海南、福建、江西、湖北等地，尤盛行于两广、香港等地，市场需求量大。传统中医认为其性平、味甘，具有补虚润肺、壮腰健肾、强筋活络之功效。现代研究发现，牛大力含有黄酮类、皂苷类、生物碱类、多糖类等多种成分，可用于治疗肺虚咳嗽、腰肌劳损、风湿性关节炎等病症。

广东作为中医药强省，当地居民对于中药，尤其是药食两用的品种尤为重视与认可，素有利用药材煲汤制作药膳进行日常养生调理的饮食习惯，而牛大力在保健方面的特殊功效亦受到人们的青睐，现其种植已发展成为一大产业，种植区域及面积逐年上升，引发其品质参差不齐，而国家尚未出台牛大力质量标准。为此，本文采用UV法，测定不同产地牛大力水提物中总黄酮、总皂苷及总多糖含量，为牛大力的选用及质量评价提供试验依据，报道如下。

第二部分：仪器与试药

2.仪器与试药

2.1仪器

紫外分光光度计；电热鼓风干燥箱；电子分析天平；旋转蒸发仪；恒温水浴锅。

2.2试药

2.2.1药材不同产地的牛大力

2.2.2试剂芦丁对照品(批号:100080-201811，纯度92.4%)、人参皂苷Rb1对照品(批号:110704-201827，纯度91.4%)、D-无水葡萄糖对照品(批号:110833-201707，纯度99.9%)均购自中国食品药品检定研究院;无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、香草醛、冰醋酸、高氯酸、苯酚、浓硫酸均为分析纯;水为蒸馏水。

第三部分:方法与结果

方法与结果

3.1牛大力水提液制备

准确称取不同产地牛大力饮片各50g，按料液比1∶30(g·ml－1)加入水，浸泡1.0h，100℃加热回流提取2次，每次1.0h，过滤(300目筛)，取滤液于80℃减压浓缩至适量，定容成1.0g·ml－1溶液(以生药材计)，备用。

3.2总黄酮含量测定

3.2.1溶液配制

3.2.1.1对照品溶液取芦丁对照品适量，精密称定，加60%乙醇制成质量浓度为1.09mg·ml－1的对照品溶液。

3.2.1.2供试品溶液精密吸取0.2ml“3.1”项下的水提液，加蒸馏水定容至5.0ml，即得供试品溶液。

3.2.2标准曲线绘制分别吸取0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8ml对照品溶液，加入5%NaNO2溶液0.5ml，混匀后静置6min，再加入5%Al(NO3)3溶液0.5ml，混匀后静置6min，再加入4%NaOH溶液4.0ml，用60%乙醇定容至10ml，放置15min后于510nm处测定吸光度值。以吸光度值(Y)为纵坐标、芦丁质量浓度(X，μg·ml－1)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程:Y=0.011X－0.12，r=0.9994。结果显示，芦丁在32.70～87.20μg·ml－1浓度范围内与吸光度值呈现良好线性关系。

3.2.3精密度试验精密吸取6份0.5ml对照品溶液，按“3.2.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，结果吸光度值的RSD为1.02%(n=6)，表明仪器精密度良好.

3.2.4重复性试验精密吸取6份1.0ml供试品溶液(批号:YF1001)，水浴蒸干后加入1.0ml的60%乙醇溶解，按“3.2.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，计算得平均含量为393.24μg·ml－1，RSD为0.97%(n=6)，表明方法的重复性良好。

3.2.5稳定性试验精密吸取1.0ml供试品溶液，水浴蒸干后加入1.0ml的60%乙醇溶解，按“3.2.2”项下操作反应，3h内每隔0.5h于紫外分光光度计测定吸光度值，结果吸光度值的RSD为1.02%(n=6)，表明牛大力水提液在3h内显色反应稳定。

3.2.6加样回收率试验精密吸取6份“3.2.1”项下已知含量的供试品溶液(批号:YF1001)各1.0ml，水浴蒸干后加入1.0ml的60%乙醇溶解，再分别加入“3.2.1”项下对照品溶液0.4ml，按“3.2.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，计算平均回收率为98.87%，RSD为1.44%(n=6)，表明方法的准确性良好。

3.2.7含量测定按“3.2.1”项下操作对不同产地牛大力水提液进行稀释后分别精密吸取1.0ml，水浴蒸干后加入1.0ml的60%乙醇溶解，再按“3.2.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，代入回归方程计算总黄酮得率，具体结果见表2。

3.3总皂苷含量测定

3.3.1溶液配制

3.3.1.1对照品溶液取人参皂苷Rb1对照品适量，精密称定，加甲醇制成质量浓度为0.95mg·ml－1的对照品溶液。

3.3.1.2供试品溶液精密吸取1.0ml“3.1”项下的水提液，加蒸馏水定容至10.0ml，即得供试品溶液。

3.3.2标准曲线绘制分别精密吸取0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml对照品溶液，60℃水浴挥干，加入5%香草醛冰醋酸试液0.2m使溶解，再加入0.8ml高氯酸，混匀，60℃水浴20min，取出冰水冷却，加入5.0ml冰醋酸，混匀后于540nm波长处测定吸光度值，以吸光度值(Y)为纵坐标、人参皂苷Rb1质量浓度(X，μg·ml－1)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程:Y=0.0035X+0.16，r=0.9974。结果显示，人参皂苷Rb1在15.83～158.33μg·ml－1浓度范围内与吸光度值呈现良好线性关系。

3.3.3精密度试验精密吸取6份0.4ml对照品溶液，按“3.3.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，结果吸光度值的RSD为1.32%(n=6)，表明仪器精密性良好。

3.3.4重复性试验精密吸取6份供试品溶液(批号:YF1001)各1.0ml，水浴蒸干，按“3.3.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，计算得平均含量为253.09μg·ml－1，RSD为1.45%(n=6)，表明方法的重复性良好。

3.3.5稳定性试验精密吸取供试品溶液1.0ml，水浴蒸干，按“3.3.2”项下操作反应，3h内每隔0.5h于紫外分光光度计测定吸光度值，结果吸光度值的RSD为1.33%(n=6)，表明牛大力水提液在3h内显色反应稳定。

3.3.6加样回收率试验精密吸取6份“3.3.1”项下已知含量的供试品溶液(批号:YF1001)各1.0ml，分别加入“3.3.1”项下对照品溶液0.3ml，水浴蒸干，按“3.3.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，计算平均回收率为98.56%，RSD为1.93%(n=6)，表明方法的准确性良好。

3.3.7含量测定按“3.3.1”项下操作对不同产地牛大力水提液进行稀释后分别精密吸取1.0ml，水浴蒸干，按“3.3.2”项下操作进行反应后测定吸光度值，代入回归方程计算总皂苷得率，具体结果见表3。

3.4总多糖含量测定

3.4.1溶液配制

3.4.1.1对照品溶液准确称取15.86mg的D-无水葡萄糖对照品，加水定容成浓度为0.1586mg·ml－1的对照品溶液。

3.4.1.2供试品溶液精密吸取0.1ml“3.1”项下的水提液，加蒸馏水定容至100ml，即得供试品溶液。

3.4.2标准曲线绘制分别吸取0.1，0.2，0.3，0.4，0.5ml对照品溶液，补足蒸馏水至2.0ml，再加入1.0ml5%苯酚溶液和5.0ml浓硫酸，水浴15min，取出冷却后于490nm波长处测定吸光度值。以质量浓度(X，μg·ml－1)为横坐标、吸光度值(Y)为纵坐标绘制标准曲线，得线性回归方程:Y=0.072X+0.074，r=0.9995。结果显示，D-无水葡萄糖在1.98～9.91μg·ml－1浓度范围内与吸光度值呈良好线性关系。

3.4.3精密度试验精密吸取6份0.3ml对照品溶液，按“3.4.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，结果吸光度值的RSD为0.73%(n=6)，表明仪器精密度良好。

3.4.4重复性试验精密吸取6份供试品溶液(批号:YF1001)各1.0ml，按“3.4.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，计算得平均含量为27.69μg·ml－1，RSD为1.66%(n=6)，表明方法的重复性良好。

3.4.5稳定性试验精密吸取供试品溶液1.0ml，按“3.4.2”项下操作反应，3h内每隔0.5h于紫外分光光度计测定吸光度值，结果吸光度值的RSD为1.22%，表明牛大力水提液在3h内显色反应稳定。

3.4.6加样回收率试验精密吸取6份“3.4.1”项下已知含量的供试品溶液(批号:YF1001)各1.0ml，分别加入“3.4.1”项下对照品溶液0.2ml、蒸馏水0.8ml，按“3.4.2”项下操作反应，于紫外分光光度计测定吸光度值，计算平均回收率为98.88%，RSD为1.92%(n=6)，表明方法的准确性良好。

3.4.7含量测定按“3.4.1”项下操作对不同产地牛大力水提液进行稀释后分别精密吸取1.0ml，按“3.4.2”项下操作进行反应后测定吸光度值，代入回归方程计算总多糖得率，具体结果见表4。

第四部分:讨论

本文通过测定不同产地牛大力水提物中不同成分的含量发现，3个类别成分中总多糖含量最高，不同产地的牛大力品质不一，海南万宁的相对较好，可能与当地气候、土壤等影响因素有关，同时验证了牛大力作为食补药材，经过煲煮，能够溶解出一定量的有效成分，可起到一定的养生保健作用。

研究报道，牛大力中含有丰富的糖分、蛋白质、粗纤维、氨基酸、微量元素等营养成分。目前，鉴于具有地方传统食用习惯，国家卫生健康委员会已公示对“牛大力粉”作为新食品原料终止审查的通知，意味着其在保健食品方面的发展具有巨大的潜力，必将进一步促进牛大力产业的大力发展。为此，本文所建立的方法可用于牛大力质量检测，同时也为其质量标准制定提供试验依据。

第五部分:关于我们

上海有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。

美析主营光谱类仪器：可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、原子荧光光度计、ICP-AES、ICP-MS，生命科学仪器：超微量分光光度计、全自动核酸提取仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的实际需求，近期将陆续推出一批分析类仪器。

美析非常重视人才的引进和培养，人的因素是一个企业可持续发展的核心因素，所以美析充分尊重每一位员工，做到真正的“共建平台，实现自我”。为此美析建立了强大的培训团队，对在职员工进行荃方位的培训，帮助员工制定职业生涯规划，以期公司和员工共同发展。同时美析以“家庭、敬业、学习”的职业操守启迪着员工，每一个美析人都以饱满的热情和专业的技能完，美呈现每一台仪器、服务每一位客户。对人才的重视和尊重使公司的各个环节都充满着严谨和激情，全新的设计理念、对高精度高参数的苛刻要求、应用范围的持续延伸，所有这些都在我们的产品先进性上得到了完mei呈现；从原材料的严格验收，到各工艺流程的标准流水线作业，再到质检部门的严格出厂检测，美析人对生产各环节的苛刻要求使得公司建立起一套完善的过程质量控制系统，并在仪器的质量上得到有力体现。也因此使我们的产品受到国内外用户的一致好评。

美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在上海、北京、江苏三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。

伴随着美析跻身全球品牌仪器行列步伐的加快，美析对自身的要求不断提高，同时我们也希望能得到社会各界的关爱和支持，让我们携手共同展望。科技，必将因你我而改变。