请教油红O给细胞染色的详细步骤

度狗不让申诉 2017-01-16 13:15:52 311 浏览

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wo叫大姐姐i 2017-01-17 00:00:00

油红O染色液主要由油红O异丙醇饱和液组成，利用染料易溶于脂质的性质证明组织脂质含量的多少。适用于细胞学与组织学研究的切片观察.但渗透慢，不能长期保存;冰冻切片附贴于载玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。?染色后脂滴呈橘红色。下面来了解一下油红O染色步骤有哪些。油红O染色步骤试剂: 0.5%的油红O溶液配方(100ml)：油红O ： 1.5g 70%乙醇： 50ml 丙酮： 50ml 需要的其他试剂：异丙醇、乙醇、丙酮、苏木素（hematoxylin）染色步骤: 1．将冰冻切片(厚度为4-8um)常温干燥15-20min. 2．异丙醇孵育5分钟（避免把水带入油红O）。 3．0.5%的油红O溶液孵育7-8分钟（在60 oC烤箱） 4．85%异丙醇溶液洗3分钟 5．双脱水洗。 6．苏木素染1-1.5min。 7．双脱水洗。 8．封片剂封片结果: 脂质呈红色或者橘黄色细胞核呈淡蓝色油红O染色步骤注意事项： 1 由于脂肪易溶于有机溶剂，所以一般用冰冻切片染色来显示。 2 作脂肪染色的冰冻切片不能太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。 3 苏木素复染时间不能过长。 4 染色结果不能长期保存，应尽快观察。以上便是油红O染色步骤，油红O染色常用作染脂肪。脂类染色法Z常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用Z广泛的染料是苏丹染料，Z常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。

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本生阐述：茜素红S染色液配制方法及染色原理

　　茜素红S染色液配制方法及染色原理

　　茜素红S是橙黄色的针状体。溶于水，微溶于醇，不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素经发烟硫酸磺化，然后转变为钠盐制得。属一种蒽醌(Anthraquinone)类的衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与钙盐以鳌和方式形成复合物，用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜红素染色，产生橘红色沉积。

　　原理：茜素红S(Alizarin Red S)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术，使钙离子和茜素红S产生复合物，来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。

　　用途:络合滴定指示剂和酸碱指示剂。茜素红能和许多金属离子生成稳定的红色络色物，在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;酸碱指示剂，一变色范围PH值3.7(黄)～5.2(紫)，第二变色范围PH值10.1(紫)～12.0(浅黄);用于极谱法测定金属离子。

　　配制方法：将托盘天平上称取0.1g茜素磺酸钠定溶于100ml蒸馏水中转移入滴瓶中，贴标签备用。或用茜素红粉加PBS溶解后，要注意调节PH值到7.2过滤就可以了。0.1%的茜素红Tris-HCL(PH8.3), Tris的浓度做分子生物学一样的，用0.Imol/L的HCI或0 1%的NaOH调节。

　　保存：常温保存，有效期6个月。

　　注意事项：

　　1.试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面。

　　2.茜素红S染色时间根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下面观察，见钙盐成较深的橘红色即取出洗涤，如染色液时间过长，可能出现弥散现象。

　　3.为了您的健康和安全，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

　　茜素红S染色液本生生物公司供应：ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。

2023-05-06 10:53:49 431 0