Spinsights离心洞察第三期-AUC数据如何帮助研究人员提高AAV产量？

AAV （腺相关病毒）正迅速成为基因治 疗的首 选方法。对这些关键疗法的准确表征，在确保生产质量及患者安全方面事关重大。对实心颗粒、空心颗粒及不完全组装颗粒比例的审查尤为严格。AUC 作为空壳率检测的金标准，能提供远高于其他技术的检测精度。

利用 AUC 进行AAV分析

高分辨率 AAV 分析需求

众所周知，AAV 颗粒的遗传负荷具有可变性，只有含完整基因插入序列的颗粒才能获得预期功能。因此，对 AAV 进行纯化，只分离出实心颗粒至关重要。此外，对功能性（实心）及非功能性（空心/部分实心）颗粒比例进行表征，是优化细胞培养效率、了解生产一致性、确定剂量及确保患者安全的关键。

AUC：采用独特表征技术

分析型超速离心机（AUC）采用超速离心分离不同颗粒，并且使用光学检测器进行辅助检测。经 AUC 分析后的颗粒通常按不同沉降系数（S）分离 —— 沉降系数影响因素包括颗粒大小、质量、形状和密度。由于不同质量、密度的 AAV 颗粒其装载量也不同，而 AUC 擅长将溶液中的这些颗粒进行分离，并提供高分辨率分析数据，无需基质相互作用，检测结果更加可信。

AUC 提供分辨率更高的数据

AUC 已成为定量评价 AAV 颗粒质量及完整度的金标准。例如，相较于阴离子交换色谱（AEX），AUC 分辨率更高，可清晰鉴别颗粒，而 AEX 则表现逊色。这些高分辨率AUC分析结果不仅适用于最 终产品质量控制，对优化细胞培养方法提高实心颗粒产出率同样行之有效。

Analysis of empty (E), full (F), and partially-full (P) AAV particles with aggregates (X) via AEX (A) and AUC (B). Reproduced with permission from Wang et al.†

采用 AEX（A）及 AUC（B）分析空心（E）、实心（F）和部分实心（P）AAV 颗粒及聚集体（X）。

小结

AUC 可提供高分辨率 AAV 样品分析信息，可实现定量鉴别空心、实心、部分包装颗粒及聚集体并检测其含量。

需要扩大样品体积或升高转速以提高效率时，离心参数转换时有发生。繁琐的计算复杂且耗时，贝克曼库尔特为您提供方便实用的软件工具及在线解决方案，实现离心参数无缝转换。

简化方案转换

RPM与RCF间的相互转换

根据来源不同，离心方案的描述单位可能是RPM（每分钟转数）或RCF（相对离心力）—— RCF又称g-force（xg），一般用来表示最 大半径（rmax）处的离心力。RCF和RPM可通过转头半径进行换算，如需将方案转换至新的离心管/瓶或转头，还需了解现有离心机及新离心机的更多信息。

衡量离心效率的指标—— k 因子

从一个转头（离心管）转换到另一个转头（离心管），rmin 和 rmax均会改变，而且最 大相对离心力不能体现效率。因为K因子综合了沉降路径与相对离心力，所以可以表示沉降效率。同时K因子也能用以计算运行时间，在使用不同转头、离心管（瓶）、适配器及加样体积的情况下，都能使方案转换变得简单轻松。

离心专家”替代转头运行“小程序 

适当转换离心方案不仅需要匹配 RPM 或 RCF 值，追踪转头及离心管尺寸规格也是一个繁琐的过程。Optima XPN超速离心机配备eXpert离心专家软件，其中的模拟功能可高效进行方案转换。此外，在线转头计算器同样可以实现方案转换。

小贝学习中心”离心参数计算器“

小结

在新的离心机上使用现有离心方案，必然涉及繁琐的手工计算。贝克曼库尔特为您提供便捷、快速的转换工具。

Gaylon博士在华盛顿州立大学工作超过30年，
他是一位著名的生态系统测量专家。
他与John Morman博士合著有《Environmental Biophysics》一书。

本期讲座时间为2021年7月29日早9:00-10:00，对应北京时间为7月30日（星期五）凌晨0:00-1:00

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尊敬的用户

      您好！首先感谢您选择和使用了上海光谱仪器有限公司的产品，为了用户更好地掌握并熟练使用该仪器，学习仪器的维护知识，解决日常测试工作中的问题和困难，帮助使用者用好仪器，让仪器发挥Z大的作用。我公司定于2019年7月22日举办“2019年上海光谱第三期用户培训会”，欢迎贵单位参加，具体事项通知如下：

一.培训时间：

   2019年7月22日至2019年7月26日

二.培训地点：

   上海光谱仪器有限公司
 （上海市徐汇区钦州北路1122号91号楼8楼）

三.培训免费，食宿自理

四.培训内容：
7月22日 火焰法原理及应用
7月23日 石墨炉法原理及应用
7月24日 氢化物法原理及应用
7月25日 快速溶剂萃取原理及应用

7月26日 紫外可见原理及应用

五.联系人：赵先生

电话:  

  18917518052

  02164951739

邮箱： 

  zhaoyongqiang@spectrum-cn.cn

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（来源：上海光谱仪器有限公司）