仪器网(yiqi.com)欢迎您!

| 注册 登录
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-方案-直播- 视频

问答社区

如何评价细胞计数的准确性和精密度

dangxiaq 2016-04-08 09:55:49 450  浏览
  •  

参与评论

全部评论(1条)

  • 荷叶下的鱼的家 2016-04-09 00:00:00
    血细胞计数的误差分别来源于技术误差和固有误差.其中由于操作人员采血不顺利,器材处理、使用不当,稀释不准确,细胞识别错误等因素所造成的误差属技术误差;而由于仪器(计数板、盖片、吸管等)不够准确与精密带来的误差称仪器误差,由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差(filed error).仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差.技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正,但细胞分布误差却难于彻底消除.因此,搞好细胞计数的质量控制一般需采用以下措施. 1.避免技术误差,纠正仪器误差 (1)所用器材均应清洁干燥,计数板、血盖片、微量吸管及刻度吸管的规格应符合要求或经过校正.①计数板的鉴定:要求计数室的台面光滑、透明,划线清晰,计数室划线面积准确.必要时采用严格校正的目镜测微计测量计数室的边长与底面积,用微米千分尺测量计数室的深度.美国国家标准局(NBS)规定每个大方格边长的误差应小于1%,即1±0.01mm,深度误差应小于2%,即0.1±0.002mm.若超过上述标准,应弃之不用.②血盖片应具有一定的重量,平整、光滑、无裂痕,厚薄均匀一致,可使用卡尺多点测量(至少在9个点),不均匀度在0.002mm之内.必要时采用平面平行仪进行测量与评价,要求呈现密集平行的直线干涉条纹.Z简单的评价方法是将洁净的盖片紧贴于干燥的平面玻璃上,若能吸附一定的时间不脱落,落下时呈弧线形旋转,表示盖片平整、厚薄均匀.同时,合格的盖片放置在计数室表面后,与支持柱紧密接触的部位可见到彩虹.精选出的盖片与其他盖片紧密重合后,在掠射光线下观察,如见到完整平行的彩虹条纹表示另一枚盖片质量也符合要求.③目前临床实验室多采用一次性微量采血管采集毛细血管血,除注意定点购买使用信誉较好厂家的产品外,还应对每一批量的采血管进行抽样检查,可通过水银称重法或有色溶液比色法进行校正,误差不应超过±1%. (2)细胞稀释液应新鲜、无杂质微粒. (3)严格操作,从消毒、采血、稀释、充池到计数都应规范,尤其应注意的是血样稀释及充池时既要作到充分混匀,又要防止剧烈震荡为破坏红细胞.必须一次性充满计数室,防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖片之间的矩形边缘为宜. (4)报告法定计量单位. 2.缩小计数域误差或分布误差 由于血细胞在充入计数室后呈随机分布或称Poisson分布( ),而我们所能计数的细胞分布范围是有限的,由此造成的计数误差称为计数域误差或分布误差.缩小这种误差的有效方法就是尽量扩大细胞计数范围和计数数目,一般先进行误差估计,然后决定所需计数的数目和计数范围,只要能将误差控制在允许范围内即可.Berkson指出,当使用同一支吸管、同一面计数室,计数0.2mm2面积的细胞数,有望将 CV控制在可接受的7%以内.对于红细胞计数而言,由于红细胞数量较多,在计数室中显得比较“拥挤”,根据Poisson公式( )推断,.欲将误差控制在变异百分数5%以内,至少需要在计数室中计数400个红细胞,因此要求计数五个中方格的红细胞.事实上Berkson还通过实验证明,红细胞的计数域误差为s=0.92 ,较理论误差(Poisson分布误差)要小. 3.排除异常标本的干扰 白细胞数量在正常范围时,相对于红细胞数量来讲,其影响可忽略,但如白细胞过高(>100×109/L),则应对计数结果进行校正.方法是:①实际RBC=计得RBC-WBC.如当红细胞换算后为3.5×1012/L、白细胞换算后为100×109/L时,病人实际红细胞数应为3.4×1012/L.②在高倍镜下计数时,避开有核细胞.有核细胞体积比正常红细胞大,ZY无凹陷,无草黄色折光,可隐约见到细胞核.此外,当病人急性严重贫血时网织红细胞可提前大量释放,也给红细胞计数带来一定的干扰,而且影响网织红细胞值计算结果.其校正方法有待探讨

    赞(18)

    回复(0)

    评论

获取验证码
我已经阅读并接受《仪器网服务协议》

热门问答

如何评价细胞计数的准确性和精密度
 
2016-04-08 09:55:49 450 1
如何评价便携式矢量网络分析仪的准确性
 
2016-12-13 05:18:34 429 1
如何提高细胞计数测试的准确性,及细胞计数仪在高产稳定CHO细胞株开发中的应用回顾


01

如何提高细胞计数和活率分析的准确性?

姚金龙

贝克曼库尔特高级应用专员


讲座简介:

在各种细胞计数和活率分析方法中,台盼蓝染色细胞计数无疑是细胞活率分析的金标准。
目前,通过台盼蓝染色分析细胞活率的方法包括:传统的光学显微镜+血球计数板法,也有市场上很普遍的插片式半自动细胞计数仪,以及无需手动混匀和染色的全自动细胞计数和活率分析仪。其中,后两个分析仪器的出现,不仅很大程度地解放了人力,同时相比于显微镜+血球计数板法会更省时,更合规,所以被各大制药企业所使用。而全自动细胞计数和活率分析仪更是在工艺开发和生产质控方面表现出特有的优势,即减少了人为的样品吹打混匀和台盼蓝染色操作误差,而且每种细胞标准化的测试条件,提高了仪器间数据的一致性而广受欢迎。
但是大家在使用这些仪器一段时间后,可能会遇到这样一些问题,譬如:自动细胞计数仪的测试结果为何有时和血球计数板的结果对不上,我该相信哪一个?细胞计数仪测试标样没有问题,但一检测细胞怎么就不行了呢?为何同样都是CHO细胞,同事测试结果是符合预期的,我的为何就不行呢?
以上问题其实归结一下都是我们测试结果的准确性的问题,如何减小测试方法的人为误差?如何提高我们使用的细胞计数和活率分析仪的测试结果的准确性?这些问题都将在此次讲座中和大家一起来探讨交流。



02

高产稳定CHO细胞株构建策略

刘玉梅

上海复宏汉霖生物医药有限公司高级研究员


讲座简介:

探讨影响稳定细胞株构建要素,包括载体,宿主细胞等。基于平台优化筛选方式,在stable pool基础上结合高通量技术进行稳定细胞株筛选,分享快速开发案例,实现快速、高效、稳定细胞株筛选。



2023-01-14 16:41:53 189 0
如何增加显微镜下白细胞计数的准确性
 
2018-03-02 21:42:07 427 1
细胞电子照片,细胞如何计数?
用激光共聚焦显微镜得到细胞的电子照片,请问如何计数,用ZEN2008LightEdition可以实现吗,如何操作... 用激光共聚焦显微镜得到细胞的电子照片,请问如何计数,用ZEN 2008 Light Edition可以实现吗,如何操作 展开
2013-08-15 00:43:50 252 3
影响血细胞计数准确性的因素有哪些如何
 
2018-11-29 12:38:53 382 0
影响血细胞计数准确性的因素有哪些如何
 
2014-12-08 00:26:10 847 1
细胞计数
有没有哪位高手用血球计数器,上下数出来误差不超过4%的?有什么技巧可以授之一二吗?谢谢啦!对的对的,显微镜下看的血细胞计数板。是上下不超过10%....重复性高不?。。我做定性的时... 有没有哪位高手用血球计数器,上下数出来误差不超过4%的?有什么技巧可以授之一二吗?谢谢啦! 对的对的,显微镜下看的血细胞计数板 。是上下不超过10%.... 重复性高不?。。我做定性的时候都是乱数的。这次做定量+time course。要了我的老命了。 time course做完了。谢谢各位了。总结一下: 一是要cell suspension要充分振荡混匀,每次加样都要; 二是能不做dilution就不做,数到100-300才能真正将误差降低。 三是这么人工计数就是不准。打死一个样品做3次。要准就要用机器数。^^ 展开
2009-11-28 10:48:37 478 3
如何对产品进行计数并采用何种控制方式保证计数的准确性
 
2017-09-22 21:42:23 392 1
如何对活细胞进行计数?
 
2013-08-25 00:24:11 355 1
如何对活细胞进行计数
 
2016-12-11 09:43:58 474 1
淋巴细胞计数和单核细胞计数偏高,中性细胞计数和淋巴细胞比率偏低
 
2007-08-03 19:52:27 439 1
如何选购博大博聚细胞计数仪?细胞计数仪价格是多少?
 
2016-07-07 05:18:42 435 1
如何提高COD比色法测试的精密度和准确度
 
2013-10-24 19:25:49 285 1
如何对显微图片中的细胞进行计数,
 
2012-10-06 00:47:06 271 3
贴壁细胞计数的细胞悬液如何制备?
想问的是把贴壁细胞制成细胞悬液的过程中不是需要用缓冲液吹打么,那这个液体具体的使用量是多少?有没有什么规定?... 想问的是把贴壁细胞制成细胞悬液的过程中不是需要用缓冲液吹打么,那这个液体具体的使用量是多少?有没有什么规定? 展开
2010-05-19 11:38:01 463 1
手持式细胞计数仪是计数活细胞还是死细胞
 
2017-05-11 01:26:53 523 1
酶标仪 细胞计数
酶标仪可以进行细胞计数么?单孔多点扫描的作用是什么?和弹孔多波长扫描有什么不同么?
2010-08-11 00:58:29 329 1
电子细胞计数仪和细胞计数板哪个准
 
2017-08-22 06:56:10 512 1
不溶性微粒检测仪校准中微粒计数准确性如何计算?
 
2010-11-11 04:27:01 477 1

10月突出贡献榜

推荐主页

最新话题