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中药显微鉴定是利用显微镜观察植(动)物药材内部的细胞、组织构造及细胞内含物，明确其显微特征，从而达到鉴别目的的一种鉴定方法，是中药四大传统鉴定方法之一具有简便、经济的特点。1977年版《ZG药典》规定了药材显微鉴定，之后显微鉴定被广泛应用于药材和中成药的鉴定，2020年版《ZG药典》收载的显微鉴别更是达到2140项。

一、中药显微镜鉴定遇到的问题及需求

1、使用操作问题：

随着显微鉴定被广泛列入中药材、中成药的鉴别项下，显微鉴定又需要操作者具备丰富的理论知识和实践经验，使得显微鉴定成为检验人员的负担。

需求：操作要足够简单，减少操作人员的学习时间成本。

2、制片带来的观察问题：

太软，太硬的材料难以切片，切片厚度太厚或不均一。

需求：为满足整体观察需要，对显微镜的景深有很高要求。

3、粉末状药品及特殊质地药品难以制片需要整体观察的问题。

需求：为满足大面积样品整体观察需求，要求成像面积比较大。

4、为了分辨不同药品之间的区别问题：

既需要高分辨的局部高清成像用以分辨细胞器等细微结构，又需要在整体上对整个药品进行完整的全视野成像。

需求：为满足细胞器等细微结构的荧光检测，要求显微镜的放大倍数和分辨率比较高。

5、除明场观察外，部分药材鉴定需要荧光标记观察药材细微结构的问题。

需求：既需要彩色明场观察又需要高灵敏度荧光观察。

▲ 虫草明场切片

二、传统显微镜在中药材显微鉴定中的使用

1.手动光学显微镜，操作步骤多，效率低，无法快速JZ的进行大视野成像，无法进行自动的景深扩展不能满足较厚样品的观察需求。

▲ 图源：网络

2.体视镜虽满足厚样品的观察需求但物镜分辨率不够，导致图像细节不清晰，不同层面的荧光串扰也严重影响了荧光成像效果。

▲ 图源：网络

3. 虽然配有自动载物台的电动显微镜可以解决较大面积样品大视野成像的问题，但是由于积木式设计所带来的操作及调试的繁琐使得显微鉴定成为检验人员的负担。

▲ 图源：网络

4. 针对性的玻片扫描系统，针对扫片的大视野成像的需求进行了部分优化但还是难以解决操作繁琐问题。同时因为高度的特化性不能满足特殊样品（不能进行制片的样品，粉末状样品，微生物样品）的观察需求。

▲ 图源：网络

由此可以看出，传统显微镜在中药鉴定领域存在诸多问题，有没有一款显微镜既可以满足中药鉴定的所有需求，又操作简便，减少操作人员的学习时间成本？答案是肯定的REVOLUTION为您在中药鉴定领域带来前所未有的使用体验。

三、REVOLUTION在中药鉴别中的优势

1.突破性的设计

REVOLUTION采用正倒置一体的设计，兼具五种观察方式为一体同时配备智能化的软件系统，满足中药显微鉴定领域的切实需求。

2.强大的软件功能

3.独有的高速全视野明场/荧光扫描

将20倍镜下多色荧光全视野扫描速度提升到了1分钟，是传统显微镜速度的10倍，极大提高了用户的工作效率。

4.全自动Z轴全景深观察

在高倍镜(等于及高于40倍物镜)下，在保持高分辨观察的同时，可以对厚度较大的样本进行全景深扫描，合成，实现全景深观察。

5.Digital Haze Reduction(DHR)功能

该技术可以在镜下实时显示高分辨图像，分辨率比传统成像提高了一倍，成像速度与普通荧光成像速度相同。通过该功能，用户可以观察到更加细微的结构。

▲ DHR前

▲DHR后

6.一体化的硬件设计与智能化的软件搭配

突破了人机交流的鸿沟，触屏式极简化操作，极大降低了学习难度，用户经过简单培训，2小时即完全掌握操作方法极大的提高了实验效率，减轻了实验人员的操作负担。

四、总结：

REVOLUTION全电动荧光显微镜从用户的实际需求出发，通过颠覆性的设计与智能化的软件，在满足中药鉴定所有需求的同时，降低了用户的学习成本使用户轻松简便的进行中药显微鉴定，减轻了实验操作人员的负担，极大的提高了实验效率。

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想要开发有稳定生产能力的细胞株，除了在细胞开发中对于细胞表达能力的评估筛选以外，前期的表达载体的构建过程也非常重要。使用纳升移液技术可以显著提高细胞株过程基因合成，表达载体构建以及转染筛选等实验的实验效率，降低实验成本。

声波移液展示Echo®移液系统依靠专 利技术（U.S. Patent 6938995）和创新方法改变移液操作在整个生命科学领域中的应用。它采用动态液体分析（Dynamic Fluid Analysis™, DFA）技术和声波移液（Acoustic Droplet Ejection，ADE）技术，让研究人员能够移取多种不同类型的液体，完成微量小体积（2.5/25nL）的移液工作。全流程无需枪头耗材，无交叉风险。

纳升移液技术让细胞株构建

更快、更准、更经济

更快

—— Echo快速任意孔到任意孔移液，极速基因组装

在质粒构建前期，需要非常多的准备实验，如基因组装中将不同的DNA片段混合，在检测反应中将不同的样本组合，在NGS文库构建过程中将多个文库pooling到一起，在CRISPr基因编辑中构建sgRNA文库等等，这些实验都需要进行快速、灵活的加样移液，就算使用高通量的移液工作站，往往也要好几小时才能完成。纳升移液技术Echo的任意孔到任意孔的快速移液特点则让此类应用简单、快速化，每次转移花费更少时间更短。这为基因组装节省了高达82%的时间。

从母板任意孔转移任意体积样品到目标板任意孔中，实现快速挑选、样品混合和组合。

有效缩短实验周期

更准

—— Echo加样精 准，提高克隆效率

利用质粒上含有的抗性选择进行筛选，需要对筛选结果进行鉴定， 而qPCR也是常用的鉴定方法之一。使用Echo纳升移液技术进行微量化克隆筛选鉴定，可以以更少的实际成本精 准完成实验。使用Echo完成 qPCR的反应体系构建，通过减少每个组件的体积，并使用不使用tips的Echo，将反应体积缩小10倍，从10 μL减少到1 μL，成本降低了8倍。

精 准减小实验体积

更经济

—— Echo微量化，缩小反应体系，让新技术更经济

系统化的设计必然会带来更大的样本量，从而导致更高的费用， Echo采用声波的能量进行无接触式移液，且每滴液滴仅为2.5nL或25nL，因此可以直接省去吸头耗材的消耗，也可以将检测反应体系降低4-100倍，使成本急剧下降。

有效缩减试剂成本

Gibson and Golden Gate Assembly实验：不同反应体积的成本效益和组装效率比较

产品信息

“仅用于科研，不用于临床诊断”

细胞是生物体基本的结构和功能单位，是生物学研究的基础。传统的细胞观察是通过倒置相差（荧光）显微镜来观察细胞生长或给药前后的形态变化。但是，传统的活细胞观察方式，仅能观察到细胞瞬间的生理信息，无法反映其长时间、连续、全面、动态过程的全部信息。

▲ 图源：网络，侵删

随着科学的进步，人们对活细胞观察的需求和要求越来越高。如细胞三维培养观察（类器官培养观察），药物筛选等。且在药物筛选实验过程中，需要观察给药后，细胞的形态变化、生长、分化、迁移、凋亡、蛋白的表达分布和细胞器观察等。这需要显微镜长时间观察和聚焦不同焦平面的细胞，并且光毒性要小，因为用荧光观察细胞内的蛋白分布时，荧光会对细胞产生一定的损伤；对一些细胞聚集成团的厚样品来说，需要显微镜具有Z-Stcaking和三维重塑功能且分辨率要求高；同时药筛具有高通量需求，在多孔板内药筛实验中，活细胞观察需要显微镜快速在多样品孔之间进行切换、自动聚焦和荧光通道切换等，这些活细胞观察需求对显微镜功能模块要求极高。

▲ 图源：网络，侵删

那我们先来了解一下Revolution正倒置一体电动化智能显微成像系统。

请注意！Revolution正倒置一体电动化智能显微成像系统所设计的功能模块完美契合活细胞观察，近为之而生，搭载的实时DHR技术，使分辨率得到进一步突破，简单多功能的联用让您感受不一样的操作体验。

HyperScan高速拼接大视野成像功能，即可以快速扫描整个样品孔又能解决高倍镜下视野小的问题。

孔板导航成像功能（Multi-well Point）结合延时摄影成像功能（TimeLapse）、自动对焦与长时间锁焦，再搭配活细胞工作站和全自动载物台，可以实现孔板中活细胞长时间观察又可以一次性研究筛选多种不同浓度的药物对细胞的影响。

Z-Stacking+DHR功能再结合自动LED荧光系统，可以更加清晰的观察细胞内不同蛋白的分布，进行三维重塑，同时降低荧光光毒性和光漂白。高速高灵敏相机捕捉微弱荧光信号，使图片结果更准确更清晰。

Revolution正倒置一体电动化智能显微成像系统是一台专业的智能活细胞观察显微成像系统，对从事研究活细胞观察研究的您，必须拥有一台高颜值、高性能、易操作的研究级显微系统，Revolution您值得拥有！

快到年底，来年的采购即将提上日程

目光不由自主锁定实验室常用设备离心机

包括离心机转子，这一重要的配件

想挑选合适的离心机转子怎么做功课？

需要考虑哪些方面？

转子是离心机的重要配件，大多数离心机主要是由主机和转子两部分组成。作为离心机主要的运行部件，转子的好坏直接影响到分离效果，同时要选择适合的转子才能保证离心的安全性。

通常来说，一台离心机可以搭配多个不同的转子进行不同的配套使用，并且可以通过不同型号与规格的转子来满足不同实验的离心需求。选择离心机转子主要从以下两个方面来考虑：离心机转速不同，决定离心机转子材料的选择；不同的实验需求，也让离心机转子选择有所不同。

一、转子材质如何选择？☑ 转子的材质主要综合考虑以下三个方面：

1. 转子的受力程度；

2. 转子材料对所处理样品的耐腐蚀程度；

3. 转子在不同类型离心机上所能允许的限定转速及容量。

☑ 通常来说，不同转速所适宜选用的转子材料不同：

1. 5000r/min以下的低速离心机转子一般用普通钢、不锈钢和工程塑料制造。

2. 5000-50000r/min的高速离心机和部分超速离心机，因其转速较高，由高速转动所产生的离心力也越大，而离心力是与材料的密度成正比的。所以50000rpm以下的高速和部分超高速离心机的转子材料需要选用高强度、高密度的材料，综合考虑铝合金材质为宜，重量轻、强度高、造价相对较低。

3. 超过每分钟50000rpm的超高速离心机则最/好选用钛合金了。钛合金具有密度小，比强度和比断裂韧性高，疲劳强度和抗裂纹扩展能力好，低温韧性良好，抗蚀性能优异特性，但是其价格成本也比较高

二、水平转子和角转子如何选择？

离心机的转子按照实验需求主要分为两类，水平转子和角转子。选择哪一类转子，主要考虑三个关键因素：离心类型（微分，速度带或等密度），转速和容量范围。

01

水平转子

亦称甩开转子（摆平或是摆桶转子）。转子静止时，处于转头中的离心管中心线与旋转轴平行。转头旋转加速时，受离心力作用而由垂直位置甩到与旋转轴成90°角位置，样品则沉淀集中于离心管底部。

 02角转子

角转子是离心中使用最为常见的转子，顾名思义离心管与转子的转轴之间有一定的角度，角度范围通常在14°-45°之间。主要用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。颗粒在扇形溶液移动的距离很短，碰到外壁的颗粒沿着管壁滑到管底，形成沉淀，因此这种转子能很快地收集沉淀物。此种转子重心低，寿命长，转速较高，能承受的最大离心力较高，最高可达800000×g。角转子主要用于差异分离、从悬浮液中沉淀出颗粒或收集颗粒等。这些转子中的空腔的体积范围从0.2mL到1L，速度范围从个位数到1,000,000×g（RCF，相对离心力）。

（▲角转子）

角转子中最为常见的是固定角转子，其重心低，阻力小，运转稳，宜进行高速分离。但是固定角转子不宜大容量分离，因为颗粒沉降时，先沿离心力方向撞向离心管，然后沿管壁滑向管底，管的一侧会出现颗粒沉积而产生壁效应，影响分离效果。

 角转子与微量高速离心机如何搭配

对于微量高速类的离心机来说，常见的角转子单管容量为1.5mL、2mL、5mL和PCR排管。

瑞沃德微量高速离心机（常温/冷冻）新增可兼容5mL离心管的气密性快锁转子，不仅可以高温灭菌，也搭配了快锁转子盖设计，仅需旋转1/6圈即可快速锁定，方便样品拿取。当然我们也可搭配1.5mL/2mL离心管的气密性快锁转子，满足不同的实验需求。

# 微量高速离心机（常温/冷冻）

▶让离心变得更简单

• 最高转速：15800rpm

• 最大容量：5mL*10

• 冷冻款可一键快速遇冷，室温降到4℃仅需8分钟

• 气密性快锁转子，样品处理便捷又安全

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在进行pH测量时，为了保证测量结果准确、可重复，您需要考虑：

       1.根据您的样品选择合适的电极

       2.做好使用前的准备工作

       3.是否需要进行校准

       4.电极是否保存得当

       5.如何对电极进行清洗

       6.测量过程中是否需要搅拌

       7.电极是否可以正常使用

瑞士万通想您所想，

为您揭开避免pH测量错误的奥秘！

1 轻松选择合适的电极

       现在就进入您手机的应用商店，搜索并下载“Metrohm Electrode Finder”，一个app在手，解决您滴定和pH测量的电极选择问题。

       您还可以登录瑞士万通官方网站，搜索“8.109.6004”，下载关于介绍pH测量电极选择的相关资料。

2 电极使用前的准备要点

       检查电极是否破损或被污染

       打开橡胶塞使电解液可以流动

       保证电解液液面在充液孔下方边缘

       使被测样品淹没电极的玻璃膜和隔膜

3 关于电极校准您应该知道的

       根据测量次数和所测样品的基质不同，至少一周校准一次。

       对于使用频繁或者样品基质容易污染电极的测试，建议每天校准或者更加频繁。

       新电极、刚进行了保养的电极或者长时间未使用的电极需要在使用前先校准。

       进行电极校准时请确认电极校准缓冲液在保质期内。

       至少进行两点的校准，且待测样品的pH值应在电极校准缓冲液的pH值范围内。

       由于pH值与温度有关，所以请注意测量温度，并与pH温度补偿表对照。

4 pH电极不能干燥保存

       对于内参液为3mol/L氯化钾的pH电极，可以使用内参液保存电极，或者使用瑞士万通开发的专用保存液保存（实验表明，使用专用保存液可以提速增效。）。

       对于内参液非3mol/L氯化钾的pH电极，保存在其相应的内参液里即可。

5 别让不当的电极清洗操作影响测定结果

       在两次测试间隙，用去离子水冲洗电极。

       如果为粘稠的或含蛋白质的样品，需要使用适当的溶剂去除。

       不要使用纸巾擦拭电极及玻璃泡，轻轻沾干即可。

       定期使用瑞士万通的pHit Kit，给电极做一次GX的清洁。

6 测量中使用相同的搅拌速度以保持信号稳定

7 通过校准后检查斜率和pH(0)判断电极状态

       为了了解您的电极是否仍然可以使用，通常需要在校准后检查斜率和pH(0)。斜率应该在95-103%之间，而pH(0)应该在pH 6.8-7.2之间。

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瑞士万通ZG

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  Marketing@metrohm.com.cn

（来源：瑞士万通ZG）

皮革是经脱毛和鞣制等物理、化学加工所得到的已经变性不易腐烂的动物皮，真假皮革在皮革制品市场上是常见的字眼，是人们为区别合成革而对天然皮革的一种习惯叫法。那么怎么区分皮革质量的优劣，怎么鉴定皮革的真伪呢？下面我们用显微镜给大家科普一下。

一、皮革质量鉴定-金相显微镜MJ33搭配显微镜相机

金相显微镜MJ33搭配显微镜相机拍摄天然皮革

金相显微镜MJ33采用上光源照明，适合观察不透明的皮革样品。主要是通过对组织形貌的检查来分析皮革 ， 各类皮革通过不一样的加工处理后的显微组织会有不同 ，以此来判断皮革质量的好坏。

二、皮革真假鉴定-体视显微镜

皮革来源于动物皮，因此在体视显微镜下可以清晰看到表面不均匀的毛孔。

假皮革是化工合成品，仿皮革做的表面纹理，但在体视显微镜放大下根本看不到毛孔。

体视显微镜MZ62

明美MZ62体视显微镜，可以从不同角度观察样品，对无需加工制作样品，可直接放入物镜下配合斜射照明即可观察。应用于生物学、医学、农林、工业及海洋生物各部门。

如果您对皮革显微镜感兴趣或有疑问，欢迎与我们联系，期待与您相约！

来源：http://www.mshot.com.cn/kehuanli/20220524.html，转载请保留出处，谢谢！

为什么传代后细胞存活率不佳？

为什么细胞生长不均匀？

为什么细胞生长越来越慢？

……

细胞传代作为细胞培养中的重要步骤

经常有朋友在后台追问十万个为什么

今天咱们聊聊细胞传代教你掌握传代的技巧

复制链接搜索，了解细胞培养干货

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1.什么是细胞传代

细胞在培养过程中不断增殖，培养皿/瓶空间有限，当细胞接触过密，生长就会受到YZ，影响细胞状态，因此我们要把其中一部分细胞分到别的培养皿/瓶，使细胞能够持续扩增。

细胞传代可以帮助我们扩大细胞培养的数量，同时也避免了因细胞进入平台期乃至衰亡期而大量死亡的窘境。

2.一般细胞传代流程&注意事项

No.1 材料准备

仪器

①离心机 ②水浴锅 ③酒精灯 ④超净工作台

溶液配制

①PBS液 ② 0.25 ％ 胰蛋白酶 ③基础培养基 ④胎牛血清

No.2 传代前准备

（1）预热培养用液：把已经配制好的装有培养液的瓶子放入37℃温箱/洁净水浴锅内预热，用酒精棉球擦拭好后放入超净台内；

（2）75％酒精擦拭超净工作台消毒、紫外线照射30min；

（3）在超净工作台中按次序摆放好无菌的移液器、移液管、离心管、巴斯德管、培养瓶等；

（4）75%的酒精擦拭双手消毒；

（5）点燃酒精灯：注意火焰不能太小，注意酒精量不能超过瓶身的2/3。

No.3 实验步骤

（1）从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞；

（2）在超净工作台内将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒，保证细胞瓶的开口朝向酒精灯方向并保持10cm距离防止明火扰乱气流杂质落入培养体系；

（3）小心吸出旧培养液，加3ml无菌PBS后盖上瓶盖，轻轻摇动细胞瓶冲洗细胞，倒弃；

（4）根据培养瓶的大小加入适量的胰蛋白酶，根据不同细胞选择不同消化条件，一般ZJ消化温度是37 ℃，但是易消化的细胞要注意消化时间避免过度消化；

（5）显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度（注：若细胞叠层生长可先用少量胰酶将叠层细胞消化下来，再对底层生长均匀的细胞进行正常的消化操作，正常细胞避免二次消化）；

（6）加入2倍体积的完全培养基（含血清）中止胰蛋白酶的作用，用巴斯德管/移液管/吸头等将已经消化细胞吹打成细胞悬液；

（7）将细胞悬液吸入15 ml离心管中；

（8）平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000rpm/min离心5分钟；

（9）弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2 ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液；

（10）分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

（11）用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱（推荐使用瑞沃德 D180-P二氧化碳培养箱）中继续培养。1.5~2小时左右开始沉降并贴附在瓶壁上。

No.4 注意事项

（1）正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染；

（2）倒置显微镜下观察细胞量，必要时进行细胞计数。密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml；

（3）在每一个培养瓶做好标记，至少包括细胞名称、细胞代数、接种日期、接种人；

（4）部分传代细胞（如PC12细胞), 少量的胰蛋白酶不影响细胞的生长，故可跳过实验步骤 (7)-(9);

（5）严格的无菌操作；

（6）适度消化：消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响，消化过程中应该注意培养细胞形态的变化，一旦胞质回缩，连接变松散，或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。

3. 常见操作问题&解答

Q:贴壁细胞传代如何使用胰酶？

A：一般使用trypsin-EDTA浓度为0.25%trypsin-0.53mMEDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02 mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在–20°C，解冻在4°C进行，DY次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于–20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin活性降低，并可减少污染机会。

Q:如何控制胰酶消化时间？

A：胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。

不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度等有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录ZJ消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。

Q:贴壁细胞如何进行传代？

A：去掉原培养瓶里面的培养基，加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA (1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000 rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。

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