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　　正确操作人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒以其敏感性高、特异性强、重复性好的优点，在科研中深受广大，科研工作者的喜爱。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒检测原理:

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm  波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒样品收集、处理及保存方法:

　　1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　3、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟。

　　4、取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。

　　注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒操作

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒：

　　1、灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为1.0 nmol/L。

　　2、特异性：不与其它细胞因子反应。

　　3、重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

　　正确操作人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒,本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。   既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　我司人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒以其敏感性高、特异性强、重复性好的优点，在科研中深受广大，科研工作者的喜爱。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒检测原理：

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm  波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒样品收集、处理及保存方法：

　　1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　3、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟。

　　4、取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。

　　注：标本溶血会影响测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒操作：

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒：

　　1、灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为1.0 nmol/L。

　　2、特异性：不与其它细胞因子反应。

　　3、重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

　　教你正确操作人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒，本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，于为生命科学研究领域提供产品，为广大科研工作者提供服务。   既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　ELISA试剂盒正确提纯的方法您知道吗？

　　在我们做ELISA试剂盒实验的时候，该怎么做才能提纯呢?针对这个问题天津本生生物ELISA试剂盒公司整理了以下几个方法。

　　试剂盒提纯方法：

　　1、蒸馏：对于易挥发的试剂，如常用的无机酸，有机溶剂等是比较常用的提纯方法，根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。

　　2、升华：对于某些易升华的试剂，如碘、萘等，此法比较简便。

　　3、重结晶：适用于大多数固体试剂的提纯，其关键是选择好合适的溶剂。

　　4、溶剂萃取：无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中，均可达到提纯的目的。

　　5、离子交换色谱分离。

　　ELISA试剂盒收集标本请按下列流程进行操作：

　　1、细胞上清标本离心去除悬浮物后即可。

　　2、血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液。

　　3、血浆标本，推荐用EDTA的方法收集。

　　4、若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于-20℃，避免反复冻融。

　　5、血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂。

　　6、标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。

　　7、请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。

　　天津本生ELISA试剂盒公司得到广泛的应用，和各大高校、研究机构等建立了深厚的合作关系，为科研事业贡献绵薄之力!本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，于为生命科学研究领域提供产品，为广大科研工作者提供服务。   既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　在我们做ELISA试剂盒实验的时候，该怎么做才能提纯呢?针对这个问题天津本生ELISA试剂盒公司整理了以下几个方法。

　　试剂盒提纯方法：

　　1、蒸馏：对于易挥发的试剂，如常用的无机酸，有机溶剂等是比较常用的提纯方法，根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。

　　2、升华：对于某些易升华的试剂，如碘、萘等，此法比较简便。

　　3、重结晶：适用于大多数固体试剂的提纯，其关键是选择好合适的溶剂。

　　4、溶剂萃取：无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中，均可达到提纯的目的。

　　5、离子交换色谱分离。

　　ELISA试剂盒收集标本请按下列流程进行操作：

　　1、细胞上清标本离心去除悬浮物后即可。

　　2、血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液。

　　3、血浆标本，推荐用EDTA的方法收集。

　　4、若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于-20℃，避免反复冻融。

　　5、血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂。

　　6、标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。

　　7、请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。

　　本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，于为生命科学研究领域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。

　　产品涵盖有荧光定量PCR耗材(八联管,单管,96孔板,384孔板,封板膜,辅助器等)，ELISA试剂盒，移液器吸嘴，离心管，冻存管，培养皿，培养板，培养瓶，吸头，仪器及手套，培养基，抗体，血清，色谱耗材，针头过滤器及实验室常用耗材。 品种类超过万种，广泛应用于科研院校、ZX实验室、分子生物学等科研领域。

　　如何减少ELISA试剂盒实验中背景因素?本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　本生教你正确操作小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒

　　小鼠免疫球蛋白试剂盒检测原理:

　　小鼠免疫球蛋白试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被对称性免疫球蛋白A(IgA)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成ZZ的黄色。颜色的深浅和样品中的对称性免疫球蛋白A(IgA)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm   波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

　　小鼠免疫球蛋白试剂盒样品收集、处理及保存方法:

　　1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　3、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟。

　　4、取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。

　　注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　小鼠免疫球蛋白试剂盒操作:

　　小鼠免疫球蛋白试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

　　小鼠免疫球蛋白试剂盒：

　　1、灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为1.0 nmol/L。

　　2、特异性：不与其它细胞因子反应。

　　3、重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

　　本生教你正确操作小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒,本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　本生教您如何选择ELISA试剂盒的正确步骤

　　ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用，然而实验新手们面对各种各样、动则上上千种的ELISA试剂盒，内心应该是崩溃的。

　　各种厂家、品牌，各种种属，各种因子，琳琅满目，质量良莠不齐，如何浪里淘金，选择既符合研究需求，又品质上乘的 ELISA 试剂盒呢?

　　本生技术小编教你几招，一眼“相中”、最合适的那个ELISA试剂盒!

　　首先，你要明确研究种属：

　　一般来说，厂家都会在产品名称上标明种属，且为单词，检索种属的常用语言为英文。

　　如果您需对不同物种的同一因子进行定量，建议优先寻找适用于多个种属的 ELISA 试剂盒，产品介绍中会注明

　　其次，要明确样本类型：

　　不同厂家验证样本类型不同，即使同一厂家不同试剂盒，其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本，根据样本处理方式的差异，分为 EDTA 血浆、肝素抗凝血浆和柠檬酸盐血浆，因此购买前需仔细核对。

　　第三步：要会预测自己的目标因子的浓度

　　一般来说，待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围，且正常人与疾病状态存在差异。如热门炎症因子 IL-6，正常人血清中浓度为 3.13 pg/mL，病人会显著，CAR-T 回输病人血清中的 IL-6 浓度甚至为正常人的 200 倍以上。

　　因而，必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。

　　若浓度太低，可选择高敏试剂盒;若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大，建议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。

　　如同样为 IL-6 ELISA 试剂盒，各类型检测范围差异较大，需要根据实际情况选择合适的试剂盒。

　　第四步：检查试剂盒进行过哪些质控

　　质控数据在说明书中即可找到，在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验，包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等，每个数据都看一下，确保的结果重现性及准确性。

　　第五步：确定需检测的因子数量

　　如果待测因子超过 5 个，且样本量较小时，单因子 ELISA 检测方法并不是选择。

　　建议考虑多因子检测方法，如固相芯片(样本数量一般 5 个以内，检测指标可达上百个)及 Luminex 液相芯片方法 (检测样本多达 80 个，检测指标多达 50 个)或微流控 ELISA 检测系统 Ella。

　　可节约样本及时间成本，也可保证检测结果准确。

　　第六步：预算评估

　　预算往往是大家优先考虑的，实际上，不能够一味讲究产品价格，更需要考虑性价比。生物学是极其严谨的科学，一致性的实验结果是基金、文章等评审过程中的因素，即使低廉的价格，不能够重现结果，也是资源的另一种浪费。

　　本生ELISA检测 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　人Ⅰ型胶原α1(COL1α1)ELISA试剂盒是最正确的方法，本生生物公司供应：ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。

　　人Ⅰ型胶原试剂盒操作注意事项:

　　1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。

　　3、不同批号的试剂不要混用。

　　4、人Ⅰ型胶原试剂盒保质前使用。

　　5、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。

　　7、实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

　　人Ⅰ型胶原试剂盒样品收集、处理及保存方法:

　　1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　3、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟。

　　4、取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。

　　注意：尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

　　人Ⅰ型胶原试剂盒性能：

　　1、灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.1 ng/mL。

　　2、特异性：不与其它细胞因子反应。

　　3、重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

　　人Ⅰ型胶原α1(COL1α1)ELISA试剂盒是最正确的方法，我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

85℃  5min能全部杀灭霉菌、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌吗？

食源性致病菌污染是乳制品安全问题的重要隐患之一。乳品中常见的食源性致病菌有金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌等。目前乳品致病菌检测以培养法为主，但此类方法操作较为繁琐并耗时长，不能满足检测时效的需求。

在本期的推送中，探索了荧光定量PCR技术在乳品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌快速检测方面的应用，并进行了大量验证试验、实际检测，形成乳品中致病菌快速检测创新体系，该创新体系可以实现金黄色葡萄菌和沙门氏菌24h内完成增菌和检测。缩短了整体检测时间，并降低了检测成本，为进一步改良乳品中致病菌快速检测提供了可参考的数据。

珀金埃尔默旗下的良润生物研发出创新检测体系，优化了样品前处理过程，并引入了荧光定量PCR分子检测技术，可以实现金黄色葡萄菌和沙门氏菌在24h内完成增菌和检测。

扫描下方二维码，即可下载珀金埃尔旗下良润生物《乳品中致病菌快速检测解决方案》及《微生物快速检测产品信息》

另外为更好的了解乳制品企业致病菌的检测需求，jing准的提供致病菌检测解决方案，珀金埃尔默旗下良润生物展开线上有奖问卷调查。点击下方链接，即可访问调研页面。

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　　elisa实验：怎么保存ELISA试剂盒?

　　(1)要留心避免出现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因而，在以HRP为符号酶的ELISA试剂盒测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很简单在温育进程中吸附于固相，然后与后边参与的HRP底物反响显色。

　　(2)样本的收集及血清别离中要留心尽量避免细菌污染，一则细菌的成长，其所分泌的一些酶或许会对抗原抗体等蛋白发作分化效果;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定方法发作非特异性搅扰。

　　(3)血清标本如是以无菌操作别离，则可以在2～8℃下保存一周，ELISA试剂盒如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长期保存，应在-70℃以下。

　　(4)冰冻保存的血清标本须留心避免因停电等形成的重复冻融。ELISA试剂盒标本的重复冻融所发作的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发作损坏效果，然后引起假阴性效果。此外，冻融标本的混匀亦应留心，不要进行剧烈振动，重复倒置混匀即可。

　　(5)标本在保存中如出现细菌污染所形成的的混浊或絮状物时，应离心沉积后取上清检测。Elisa试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的试验确诊方法。因为其试剂安稳、易保存，操作简洁，效果判断较客观等要素，已广泛应用在免疫学查验的各领域中。ELISA试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。成长环境之中的有用因子和营养成分进行更好的了解，确保这种血清原材料的成长活性和可靠性更高，以更加的品质让这种动物细胞培养的活性得到大幅度的提升;

　　ELISA试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

　　仅供体外研究使用

　　本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中大鼠(Acetyl-Foxo3a)的含量。

　　有效期：6个月

　　保存条件：2-8℃

　　[实验原理]

　　试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被肿瘤坏死因子α捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成ZZ的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α呈正相关。用酶标仪在450nm  波长下测定吸光度(OD 值)，计算样品浓度。

　　[样本处理及要求]

　　1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20  分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃  1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M,   pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

　　4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　[需要而未提供的试剂和器材]

　　1.酶标仪(450nm)

　　2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

　　3.37℃恒温箱

　　4.蒸馏水或去离子水

　　[试剂盒组成]

　　1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ; 2 酶标试剂 6ml×1 瓶

　　3 酶标包被板 12 孔×8 条 ; 4 样品稀释液 6ml×1 瓶

　　5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ; 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶

　　7 终止液 6ml×1 瓶; 8 标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

　　9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶; 10 说明书 1 份

　　11 封板膜 2 张; 12 密封袋 1 个

　　肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 【备注】：

　　1. 标准品浓度依次为：600、300、150、75、37.5、18.75 ng/mL

　　2.  经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

　　[注意事项]

　　1.严格按照规定的时间和温度进行温育以准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

　　2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

　　3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

　　4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

　　5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

　　6.在储存和温育时避免强光直接照射。

　　7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

　　8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

　　9.不能使用过期产品。

　　10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

　　[试剂准备]

　　试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

　　20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

　　[操作步骤]

　　1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

　　3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

　　4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

　　6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7. 每孔加入终止液50μL，15min内，大鼠(Acetyl-Foxo3a)试剂盒在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　[实验结果计算]

　　以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度值。

　　(此图仅供参考)

　　肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒[性能]

　　1. 检测范围：18.75 ng/mL – 600 ng/mL。

　　2. 灵敏度：检测浓度小于1.0 ng/mL。

　　3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

　　4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。