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食源性致病菌污染是乳制品安全问题的重要隐患之一。乳品中常见的食源性致病菌有金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌等。目前乳品致病菌检测以培养法为主，但此类方法操作较为繁琐并耗时长，不能满足检测时效的需求。

在本期的推送中，探索了荧光定量PCR技术在乳品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌快速检测方面的应用，并进行了大量验证试验、实际检测，形成乳品中致病菌快速检测创新体系，该创新体系可以实现金黄色葡萄菌和沙门氏菌24h内完成增菌和检测。缩短了整体检测时间，并降低了检测成本，为进一步改良乳品中致病菌快速检测提供了可参考的数据。

珀金埃尔默旗下的良润生物研发出创新检测体系，优化了样品前处理过程，并引入了荧光定量PCR分子检测技术，可以实现金黄色葡萄菌和沙门氏菌在24h内完成增菌和检测。

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另外为更好的了解乳制品企业致病菌的检测需求，jing准的提供致病菌检测解决方案，珀金埃尔默旗下良润生物展开线上有奖问卷调查。点击下方链接，即可访问调研页面。

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　　正确操作人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒以其敏感性高、特异性强、重复性好的优点，在科研中深受广大，科研工作者的喜爱。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒检测原理:

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm  波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒样品收集、处理及保存方法:

　　1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　3、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟。

　　4、取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。

　　注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒操作

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒：

　　1、灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为1.0 nmol/L。

　　2、特异性：不与其它细胞因子反应。

　　3、重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

　　正确操作人金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)ELISA试剂盒,本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。   既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

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　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的对称性黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm  波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒样品收集、处理及保存方法：

　　1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　3、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟。

　　4、取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。

　　注：标本溶血会影响测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒操作：

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

　　人金黄色葡萄球菌肠毒素试剂盒：

　　1、灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为1.0 nmol/L。

　　2、特异性：不与其它细胞因子反应。

　　3、重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

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