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- smart一boy 2013-12-07 00:00:00
- 一般来讲,电解槽中间会有一个专门用于卡隔板的凹槽。隔板就是两块框式结构的片,由比较硬的又防腐蚀的材料(例如有机玻璃)制成。把阳离子交换膜夹在两块隔板中间,然后把夹有交换膜的隔板插入到电解槽中间的凹槽中就可以了。但是有个问题需要解决:这样插进去的隔板肯定不严密,会从隔板与电解槽壁的缝隙中漏液。解决方法是用密封胶在隔板四周涂一圈,然后把隔板插进去。密封胶的作用是防止漏液,隔板可以反复使用,只要把隔板抽取出来就可以了。抽取的时候要稍稍用力(因为有密封胶粘着)。至于阳离子交换膜能不能反复使用,这要咨询阳离子交换膜的厂家,可能有些交换膜在反复使用之前要经过处理。一般推荐杜邦生产的阳离子交换膜。>>>
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- 薄heweiliang 2013-12-07 00:00:00
- 离子交换膜是对离子具有选择透过性的高分子材料制成的薄膜,阳离子膜通常是磺酸型的,带有固定基团和可解离的离子 如钠型磺酸型:固定基团是磺酸根 解离离子是钠离子,阳离子交换膜可以看作是一种高分子电解质,他的高分子母体是不溶解的,而连接在母体上的磺酸集团带有负电荷和可解离离子相互吸引着,他们具有亲水性由于阳膜带负电荷,虽然原来的解离正离子受水分子作用解离到水中,但在膜外我们通电通过电场作用,带有正电荷的阳离子就可以通过阳膜,而阴离子因为同性排斥而不能通过,所以具有选择透过性。 自己是做不了的,要机械生产才行的(诚心为你解决问题希望能帮到您,点击一下【好评】吧亲,非常感谢)
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- 使用耐盐型阳离子交换填料TOYOPEARL Sulfate-650F纯化凝血因子Ⅸ
离子交换色谱(IEC)因吸附量较大,被广泛应用于血浆蛋白的粗纯工艺。但是IEC容易受到样品中盐浓度的影响,如果样品溶液中含盐,则除了过滤以外,还需要进行脱盐、透析等前处理。而另一方面,近几年市面上出现了一种不易受到盐浓度影响的耐盐型(salt-tolerant)离子交换填料,可以作为一种混合模式填料用于这类纯化应用。
最近发表在期刊《Biotechnology Journal》上的一篇文献中,研究人员使用了东曹的耐盐型阳离子交换填料TOYOPEARL Sulfate-650F,从凝血酶原复合物浓缩液(PCC)中有效纯化凝血因子Ⅸ(FactorⅨ;九因子)。
文献介绍
M. Begić et al., Salt-tolerant cation-exchanger containing sulfate groups as a viable alternative for mixed-mode type and heparin-base affinity resin, Biotechnol. J., 2021; 2100100, CC BY NC ND, https://doi.org/10.1002/biot.202100100
与以磺酸基为官能团的阳离子交换填料TOYOPEARL GigaCap S-650M和SP-650M相比,耐盐性更高的TOYOPEARL Sulfate-650F则是导入了硫酸酯基作为官能团。
为了研究磺酸型填料和硫酸酯型填料的耐盐性,作者使用了以上这3种具有代表性的阳离子交换填料。首先,使用溶菌酶考察了洗脱液的pH和盐浓度对吸附量的影响。结果表明,携带硫酸酯基的TOYOPEARL Sulfate-650F对盐浓度的依赖性有很大不同,在更高盐浓度下也具备吸附能力(参照FIGURE2)。导致该现象的原因可能是,在硫酸酯型填料中,官能团的S原子和基质的碳原子之间是-O-,那么与磺酸型的-CH2-相比,其疏水性会变高,所以具备了耐盐性。
凝血因子Ⅸ的纯化
下图是使用耐盐型阳离子交换填料TOYOPEARL Sulfate-650F分离PCC中的维生素K依赖性凝血因子的结果。
首先,使用含有0.4 mol/L NaCl的高盐浓度洗脱液,让吸附较弱的凝血因子Ⅱ、因子Ⅶ、因子Ⅹ不被填料吸附直接流穿。然后,通过降低盐浓度和提升pH的阶梯梯度洗脱,把吸附在柱子上的因子Ⅸ洗脱下来。使用Sulfate-650F无需对样品进行脱盐处理,即可获得与使用肝素亲和层析相同纯度的因子Ⅸ。
工艺开发和筛选用预装柱在工艺开发早期阶段需要进行制备填料的筛选和分离条件探讨/优化,东曹SkillPak预装柱预装填有亲和、阴/阳离子交换、疏水以及尺寸排阻等各种分离模式的TOYOPEARL层析填料。
1 mL和5 mL的SkillPak预装柱主要用于纯化工艺开发或变更时参数和方法的优化。50 mL和200 mL规格的预装柱可将开发好的纯化工艺线性放大。我们还提供耐盐型离子交换填料套装,其中包含TOYOPEARL NH2-750F和Sulfate-650F两种填料产品。
参考文献:
1. T. Burnouf, An overview of plasma fractionation, Annals of Blood, 2018, 3: 33
2. J. M. Bult, Plasma fractionation technologies: benefit and limitations, September 21, 2021
3. M. Begić et al., Salt-tolerant cation-exchanger containing sulfate groups as a viable alternative for mixed-mode type and heparin-base affinity resin, Biotechnol. J., 2021; 2100100, CC BY NC ND
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