应用|ShimNex专用柱测定抗体药物中吐温80的含量
ShimNex专用柱测定
抗体药物中吐温80的含量
背景介绍
吐温80又称聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯,简称聚山梨酯 -80,具有优良的乳化、分散、润湿等性能,抗体药物中吐温 80 的加入,能降低搅动、摇晃、冻融等过程中蛋白聚集,也可防止蛋白被吸附到容器表面等。在抗体药物制剂中加入吐温 80 同时也不能忽视其可能带来的毒副作用。吐温 80 是亲水性的表面活性剂,具有很强的破裂细胞膜的作用而引起刺激性,溶血性和组胺释放(致敏性)。因此建立抗体药物中吐温 80 的含量检测的方法对控制药物辅料安全性具有重要意义。本实验使用ShimNex S-C18-SAA色谱柱,建立了抗体药物中吐温 80 含量测定方法,该方法分析速度快,准确度好。
PART 01
实验条件
色谱柱:ShimNex S-C18-SAA
(150 ×4.6 mm I.D.,5 µm,
P/N:380-01247-24)
流动相:
A:1% 乙酸 - 水溶液;
B:1% 乙酸 - 异丙醇溶液
进样体积:10 μL
柱温:40℃
流速:1.0 mL/min
检测器:ELSD
漂移管温度:80 ℃
雾化气:350 MPa
洗脱方式:
梯度洗脱,B 相起始浓度为 10%
对照品测试
供试品测定
PART 02
实验结果
图1 吐温 80 对照溶液(50 ~1000 μg/mL)图谱
T-1 抗体制剂色谱图(左)
T-2 抗体制剂色谱图(右)
表1 抗体药物制剂 T-1 和 T-2 中
吐温 80 含量测定结果
PART 03
结论
结果表明,吐温 80 在 50-1000 μg/mL 线性浓度范围内,线性相关性良好,相关系数为 0.9947,准确度为91.2~110.3%。选择浓度为 50 μg/mL 的吐温对照品溶液分别连续进样测定 6 次。吐温 80 的保留时间 RSD% 为 0.05%;峰面积 RSD% 为 2.49%,采用ShimNex-S-SAA色谱柱建立抗体药中吐温80的含量测定方法,实验方法分析速度快,准确性好。
END
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