- 可恶!知识不受控制的进入了我的大脑!
- Dr.赛流式小课堂 | 轻松上手流式染色细胞因子实验
- 小道快讯 | 交付中心技能PK大赛奖项花落谁家
- MP工具箱 | 云学堂:一键开启免费学习平台
- 媒体报道丨国产仪器如何跑赢存量市场?
- 东隆科技诚邀您共赴CIOE 2024深圳光博会,见证光电技术革新!
- 滨松:行“专业公司”应行之事
- 参会指南 | 第一届微纳塑料检测及其标准化学术研讨会
- 8月节日 | 为猫咪、狗狗和流浪动物送上专属礼物
- 实验室磷酸根分析仪有效检测磷酸根含量高低
- Aiculture|探索微生物世界:平板计数琼脂的实用指南
- 火力发电|教科书里的奥立龙在线钠表
- 啤酒色度仪如何检测啤酒色度值?
![上海长方光学仪器有限公司](http://yiqi-oss.oss-cn-hangzhou.aliyuncs.com/aliyun/Manage/2018-07-06/20180706-2055212137.jpg)
- 来源:内容来源于网络 浏览量:240次
- 【导读】本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断大鼠(Rat)高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELIS...
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
大鼠(Rat)高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)
ELISA检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预
先包被高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)抗体的包被微孔中,依次加入
标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物
TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的高迁移率族蛋白B1
(HMGB-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD
值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞
刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地
分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟
取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于
-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的
浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解
后再使用。2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明
书操作时样本已经稀释5倍,Z终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
名称96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无
标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无
样本稀释液6mL3mL无
检测抗体-HRP10mL5mL无
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
底物A6mL3mL无
底物B6mL3mL无
终止液6mL3mL无
封板膜2张2张无
说明书1份1份无
自封袋1个1个无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、7.5、15、30、60、120ng/mL
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓
冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽
孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封
袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不
加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶
(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴
锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的
OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应
OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样
本浓度值。
试剂盒性能
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于
0.9900。
2.灵敏度:Zdi检测浓度小于1.0ng/mL。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月
免责声明
1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所
产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者
承担。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词:
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
- 2004-11-14 09:23:05
- 标签:
- 收藏(0) 赞(0) 踩(0)
-
随时了解更多仪器资讯,求购、招标、中标信息实时更新,厂商招商信息随时看。大量、齐全、专业的仪器信息尽在仪器网(yiqi.com)。扫一扫关注仪器网官方微信,随时随地查看仪器用户采购、招标需求!
-
ELISA双抗夹心法试剂盒的实验步骤2004-10-15 09:23:06
ELISA双抗夹心法试剂盒平衡:将试剂盒各组份从盒中取出,平衡至室温;配液:浓缩洗涤液配置前充分摇匀(如有晶
-
近红外荧光探针(IRB-NHS)检测试剂盒使用常见问题解答2004-07-12 15:05:27
近红外荧光探针(IRB-NHS)检测试剂盒使用常见问题解答
-
鸡传染性法氏囊病间接ELISA抗体检测试剂盒的研究2004-07-12 15:05:27
鸡传染性法氏囊病间接ELISA抗体检测试剂盒的研究
-
鸭瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制及初步应用2004-07-12 15:05:27
鸭瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制及初步应用
-
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1检测试剂盒
-
干扰素β(IFNβ)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
干扰素β(IFNβ)检测试剂盒
-
足突蛋白(PDCN)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
足突蛋白(PDCN)检测试剂盒
-
蛋白酶3(PR3)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
蛋白酶3(PR3)检测试剂盒
-
激活素AB(ACVAB)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
激活素AB(ACVAB)检测试剂盒
-
CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)检测试剂盒2004-07-12 15:05:27
CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)检测试剂盒
大鼠(Rat)高迁移率族蛋白B1(HMGB-1) ELISA检测试剂盒
-
您可能感兴趣
![](https://static.yiqi.com/Pingce/img/imgddd.png)
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi