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- 【导读】本方法(IDEXXHerdChekBSEEIAtest)由美国IDEXX公司开发研制,是一种快速简捷的酶联免疫测定方法,2004年通过美国和欧盟认证。该方法的原理是将牛脑组织制成匀...
本方法(IDEXXHerdChekBSEEIAtest)由美国IDEXX公司开发研制,是一种快速简捷的酶联免疫测定方法,2004年通过美国和欧盟认证。
该方法的原理是将牛脑组织制成匀浆悬液,用稀释液处理组织悬液,将处理后的脑组织悬液加入到包被有能选择性地捕获PrPSc的化学聚合物(英国Microsens公司ZL技术)的微孔板中,室温孵育,洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的针对PrP分子保守区的单抗,TMB显色,测定OD值,判断结果。
本方法的敏感性为100%,特异性为99.99%。本方法的特点在于不需要蛋白酶K消化,无需离心,无需特别温度的孵育,所有步骤都在室温下进行,4.5h内出结果,无需丰富的实验经验,实验废物少,所需实验空间小。
疯牛病的IDEXXEIA检测方法主要步骤如下。
(1)样品准备收集样品(脑闩部组织),匀浆,用稀释液稀释匀浆液。
(2)捕获PrPSc将稀释好的匀浆液加入到BSE病原捕获板中,由seprion亲和配体捕获。
(3)添加调节缓冲液洗去捕获板中未结合的样品,加入调节缓冲液并孵育,使捕获的PrPSc变性,以便充分暴露抗原位点。
(4)添加HRP标记的单抗洗去调节缓冲液,加入HRP标记的单抗并孵育。标记了HRP的PrP单抗结合上PrPSc。
(5)添加底物和终止液洗去未结合的单抗,加入底物并孵育。当有阳性时出现蓝色,滴加HCl终止液终止反应,颜色则变成了黄色。
(6)读值和分析用酶标仪读板,数值用IDEXXxChek软件分析。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-09-01 09:23:08
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