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各种动物外周血和脏器组织白细胞分离试剂盒操作说明:
Storeat:RT°CSize:200ml/Kit
试剂盒内容:
全血及组织匀浆稀释液100ml
细胞洗涤液100ml
试剂A100ml
试剂E100ml
说明书1份
操作方法:
A.取1ml新鲜抗凝血或组织匀浆单细胞悬液(细胞浓度为2×108-1×109个/ml,具体制备方法参照“组织单细胞悬液的制备”)与全血及组织匀浆稀释液(Cat#:2010C1119)1:1混合再与1ml的E液混匀置20℃-25℃下自然沉降30分钟。吸取浑浊的上清部分,弃去底部红细胞备用;
B.将步骤A中所得的浑浊上清液体小心叠加在A液之液面上(上清液与A液的比例为1:1);
C.以400g(约1500转/分)离心15分钟(半径15cm水平转子);
此时离心管中由上至下细胞分四层。diyi层:为血浆层。第二层:为环状乳白色单个核细胞。第三层:为混浊分离液层(此层液体中含有大量白细胞)。第四层:极少量红细胞层(如无红细胞层分离效果会更好),收集第二,三层混浊分离液及极少量红细胞层(如无红细胞层分离效果会更好)放入含细胞洗涤液(Cat#:2010X1118)4-5ml的试管中,充分混匀后,以500g(约1800转/分)离心20分钟,弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需白细胞。
注意
TBD实验室的细胞分离培养基是敏光型的。这种培养基在运输和贮藏过程中应避光保温。由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索Z佳的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。组织,血液,细胞要求新鲜,避免冷冻和冷藏。
贮藏
18-25℃避光保存。启封后置4℃保存。本品为真空包装,未启封前置于10℃以下易出现白色结晶,影响分离效果。
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- 2004-11-05 09:23:11
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