细胞实验室之怎样预防支原体污染的细胞培养

在细胞实验室里，细胞培养的过程中，支原体污染是一种常见且难以察觉的现象，可以在不知不觉中对细胞实验造成影响。那么，应该采取哪些措施预防支原体污染呢？

1、提高实验室无菌操作技术

在实验室中，熟练的技术人员应细心监督新来人员是否遵循无菌操作的规范，这可以帮助减少支原体污染的风险。强烈建议对所有细胞污染事故要进行记录和存档，以解决污染问题。

2、检查培养基是否污染

由于支原体污染的主要来源之一是从实验室外带进来的细胞，建议使用可靠的细胞库提供的细胞。

如果存在应当隔离的支原体污染的细胞，而没有单独的细胞培养箱的情况下，在隔离期内，应使用有盖的塑料细胞培养瓶。不要使用培养板和未密封的培养皿。对怀疑有污染的培养的细胞，应在每天所有其他细胞培养工作结束后再对它进行处理。应使用单独分装的培养基和试剂。强烈建议完工后要对生物安全柜进行消毒。

3、合理使用抗生素

用于细胞培养，理想的抗生素应能消除所有的污染物，对宿主细胞无毒，而不干扰实验，但没有一种抗生素能满足以上所有的标准。因此，用于细胞培养的抗生素应有限制。相反的，一个良好的无菌操作对于预防污染起着更重要的作用。

细胞培养中的微生物污染是可以通过细胞培养基的混浊或颜色变化检测到。在细胞培养中使用抗生素的情况下，有四种可能：1.对抗生素敏感。2.对抗生素耐药。3.对抗生素部分耐药。4.只有支原体对抗生素耐药。因为抗生素在培养基中不稳定，强烈建议每隔两三天进行一次换液。

4、丢弃或ZL支原体污染的细胞

如果被支原体污染的细胞较为珍贵或稀少，建议进行清除支原体的ZL。否则，建议丢弃支原体污染的细胞，因为它们被认为是实验室污染的来源。

5、隔离任何来源的新细胞

正如前面描述，从其他实验室带来的新细胞是污染的主要来源。因此，在新细胞作任何用途之前，有必要隔离细胞，并检查是否有支原体污染。

6、减少气溶胶的产生

在生物安全柜或细胞培养箱中细胞操作产生的气溶胶，以及人员自身产生的气溶胶，在实验室中都会传播支原体污染。因此，避免产生气溶胶的活动有助于预防细胞培养中的支原体污染。

7、支原体检查的重要性

根据一些报告，在美国和欧洲，正在培养的细胞或细胞库冻存的细胞中，支原体污染的几率大约是15%至35%。因此，经常进行支原体检查是非常必要的。