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如何才能通过实验动物福利伦理审查？

吸入式麻醉有哪些需要注意的要点？

投稿被拒，竟是麻醉不符合动物福利？

动物麻醉气管插管不好操作？

「全线赋能“沃”的实验」之实验方法实战教程

第一季收官直播第八期带你聚焦

《动物呼麻及气管插管实验全解》

两位老师详解实验动物福利

吸入式麻醉、机械通气等专业知识

并手把手带你走进气管插管实操

原理+实操，助你提高投稿通过率

8月9日（周二）19：00

报名方式

识别上方二维码，立即免费报名

课程1：科学认识实验动物福利

• 定义及反对者的声音

• 动物福利和伦理

• 伦理审查

讲师：饶秀茸

拓普生物副总经理，毕业于广东医科大学，拥有十五年动物实验和动物房管理从业经验，专注研发与专利撰写，曾主持参与深圳市科创委、广东省重大科技专项项目等课题。

课程2：动物呼吸麻醉原理全解

• 吸入式麻醉

• 机械通气

• 应用案例

讲师：王晓雨

瑞沃德资深解决方案专家，毕业于深圳大学，在动物呼吸麻醉方面深耕多年，目前已服务全 球超500家单位，致力于在全 球推广更符合动物福利的呼吸麻醉方案。

课程3：气管插管实操

• 气管切开插管法

• 经口插管法

• 吸入式麻醉实操

上期直播间互动问题

这次我们全部为小伙伴解答

1. 如果我只想激活一种类型的神经元应该怎么办？

答：研究的目标脑区内有多种类型的神经元，只激活其中一种类型表明需要实现细胞类型特异性刺激，几类刺激脑方法中只有光遗传刺激能够满足，通过特异性病毒载体，将光敏蛋白转染到某一类型细胞上，从而实现细胞类型特异性刺激。

2. 我埋的刺激电极总是会掉该怎么弄？

答：可以在埋植电极的同时，在颅骨附近先埋植两颗颅钉起固定作用。

3. 使用经颅电刺激能只激活一种类型的细胞吗？

答：经颅电刺激作用于一片刺激范围内的所有细胞，不能只激活一种细胞。

4. 感觉刺激中，为什么要选择40Hz的频率？

答：PPT解析的文献里研究的是AD小鼠，与认知相关。认知损伤的小鼠其Gamma频段的神经振荡也发生改变，40Hz属于典型Gamma频段，因此使用40Hz刺激诱发小鼠大脑Gamm频段的振荡。

5. 光遗传为什么给光就能激活或抑制神经元？

答：光遗传技术利用分子生物学、病毒生物学等手段，将外源光敏感蛋白基因导入活细胞中，在细胞膜结构上表达了光敏感通道蛋白；然后通过特定波长光的照射，控制细胞膜结构上的光敏感通道蛋白的激活与关闭；光敏感蛋白的激活和关闭可控制细胞膜上离子通道的打开与关闭，进而改变细胞膜电压的变化，如膜的去极化与超极化。当膜电压去极化超过一定阈值时就会诱发神经元产生可传导的电信号，即神经元的激活；相反，当膜电压超极化到一定水平时，就会抑制神经元动作电位的产生，即神经元的抑制。

6. 在脑刺激的过程中，能够同时进行脑电采集吗?

答：这需要看是哪种脑刺激方法。经颅电刺激和深部脑刺激不建议同时记录电信号，会存在干扰。光遗传刺激能够同时进行脑刺激和脑电采集，光遗传通过光进行刺激，而不是电刺激，因此不存在干扰。

7. 光遗传的刺激参数如何选择呢？

答：光遗传实验的参数有频率，脉宽，功率等。光遗传刺激的频率根据不同的实验需求而有所不同，具体情况可参考已发表的文献进行选择。刺激时不要超过通道蛋白的响应频率，不然容易出现脱敏效应。脉宽与占空比相关，在频率固定的情况下，可通过提高脉冲宽度从而提高占空比。光功率强度的选择与对应的通道蛋白有关，激活不同的光敏蛋白有不同的光功率要求。

8. 脑机接口读取到写入的闭环时间限度要少于多少呢？

答：依据任务而异，不同的任务类型对时间的要求不同。例如在常见的字符输入任务中，对时间要求不严格，延迟也没关系。

9. 无创脑机接口的外部噪音影响会不会很大？

答：无创式脑机接口容易收到外界噪音的影响，针对实验过程涉及到的外部环境、采集硬件及软件算法都需要特别注意，需要做一定程度的降噪处理。使用的电极也会对信号的噪音有一定影响，一般湿电极信号质量优于干式电极装置记录的信号质量。实验被试人员也需要注意采集期间尽量不要产生任务需求之外的移动。

10. 全植入式的电极深度在动物模型上有没有限制？

答：一般来说没有限制，但是在实际操作过程中需要考虑具体的实验对象。植入的区域多是皮层，处于脑部相对靠外的位置，不会特别深，植入过程中注意避开血管的位置。植入区域的深度多和使用的电极类型相关，例如犹他阵列电极只适合于进行大脑皮层记录。意识活动产生的脑区（NCC）很多位于丘脑等深部脑区，目前技术无法达到。

11. 全植入式电极植入获取有效数据的时间大概多久，信号衰减的主要原因有哪些呢？

答：一般良好的手术植入操作能维持半年以上的信号采集，也有一年以上还能继续采集信号的。信号衰减的原因多是植入的电极随着时间的延长，逐渐被类似“疤痕组织”的细胞所包裹而失效，或者是电极老化脱落。

12. 无创式、半植入式以及全植入式这3种不同方法对于完成闭环任务是否有时间上的差异呢？

答：没有显著的差异。延迟时间的差异主要取决于信号的传输、处理、外部设备的响应等各个方面。一般来说，植入式的会比无创的信号时间精度更好，可以完成更多复杂精确的任务。

13. 非侵入式远程收集脑电用什么技术呢？

答：一般是将普通有线的方式更换为蓝牙或者WiFi都可以。

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       6月23日下午，瑞沃德和拓普生物联合打造的“呼麻-气管插管”实操公益培训课圆满落幕。本次培训活动采取理论授课与实操教学相结合的方式，从动物福利及动物呼吸麻醉原理入手，结合吸入式麻醉机呼吸机联用和气管插管实操，学员们纷纷表示获益良多！

       培训期间，拓普生物副总经理、拥有15年动物实验和动物房管理从业经验的饶秀茸老师以“科学认识实验动物福利”为主题，详细讲授了实验动物福利制度及相关新规等知识。同时，瑞沃德资深解决方案专家王晓雨老师给大家带来了“动物呼吸麻醉原理全解”主题分享，让大家了解到麻醉过程中动物福利的重要性及吸入式麻醉的优势，同时在实操培训环节，手把手教学吸入式麻醉机呼吸机联用&气管插管实操，生动细致地为大家讲解呼吸麻醉的理论知识和实践技能等内容。

       为了让学员们能更好地进行实操学习，瑞沃德提供了自主研发的国内第一款科研专用动物麻醉机和呼吸机作为培训器材，在实操过程中，瑞沃德麻醉机和呼吸机因操作方便、性能稳定而广受大家关注。同时，瑞沃德还为学员们送上了动物实验手术器械、缓释泵、计数板等实验耗材，为他们的实验研究提供助力。多位学员表示，之前一直在用瑞沃德手术器械等实验耗材，比较耐用，性价比也很高。

       培训有终点，服务无止境。未来，瑞沃德将继续加大产能投入持续创新，为广大科研工作者提供呼吸麻醉的利器，助力大家在实验时轻松获得动物的理想麻醉，不仅让实验数据准确可靠，也符合动物实验的福利要求。同时，瑞沃德将持续打造生命科学“产学研用”的有力使能平台，通过“沃”在前沿、大成学堂、“沃”的实验等活动，促进生命科学各领域专家学者、研究人员的交流和进步。

想获取更多培训信息欢迎持续关注瑞沃德&拓普生物公众号

扫码即可关注拓普生物

你了解实验动物福利制度及相关新规吗？

你听说过因动物福利文章被撤回的新闻吗？

你想亲自体验动物实验中的呼吸机、麻醉机且熟练操作吗？

你想搞定动物麻醉中的呼吸难题吗？

你想提升众所周知难度高的气管插管手术操作？

……

心动吗？心动不如行动！

6月23日，瑞沃德携手拓普生物联合举办“呼麻讲堂-气管插管”免费动物实操培训！实验动物福利、呼麻讲堂、气管插管实操……本次免费实操培训，将大家带来系统性的行业理论、实操知识，全方位助力科研！

图注：拓普生物往期培训现场

本期演讲嘉宾分别是拓普生物副总经理、15年动物实验和动物房管理从业经验饶秀茸、瑞沃德解决方案专家王晓雨。为了让大家可以更加系统、全面地学习行业知识与掌握实操技巧，嘉宾将向大家详细地分享科学认识动物福利，以及动物呼吸麻醉原理全解等相关话题。

图注：实操培训现场将赠送瑞沃德耗材

不仅如此，本期实操培训还将赠送手术器械、缓释泵、计数板等实验耗材……同时，实操培训活动设有专门的答疑环节，专家讲师们手把手教学、细致一一解答，这福利必须得把握住了！！

培训时间

6月23日（周四）14:00-17:00

报名方式

1、致电0755-86325431，进行报名登记（培训时现场核实）；
2、将您的姓名-手机-单位-职务信息发送至瑞沃德/拓普生物公众号后台，工作人员会在1个工作日确认您是否报名成功。

长按识别拓普生物公众号

培训地点

深圳市南山区桃园街道丽山路65号民企科技园2栋东座533

PCR原理傻傻弄不清楚？

PCR实验步骤看似简单却总是做不好？

不知道不同实验目的该选哪种PCR？

「全线赋能“沃”的实验」之实验方法实战教程

直播第六期为大家讲解

《PCR技术》

从技术原理、步骤详解、类型介绍到应用领域

让你一场直播课吃透PCR

直播时间

7月5日（周二）19：00

报名方式

识别上方二维码，立即免费报名

主题：PCR技术

• PCR的原理

• 实验步骤

• PCR的分类及实际应用

讲师：方晟

昆明理工大学硕士研究生，已发表SCI论文4篇，在载体构建、药物活性筛选、肿瘤模型构建、单细胞数据分析等方面有着丰富的经验，研究方向主要是抗肿瘤药物的kang癌机理和单细胞测序分析。

上期直播间互动问题

这次我们全部为小伙伴解答

Q1：如何去选择使用全脑缺血还是局部缺血模型呢？

A1：全脑缺血模型——二血管阻断法，模拟临床休克、心功能不全、脑血管严重狭窄或阻塞等血液低灌流引起的脑循环障碍；

全脑缺血模型——四血管阻断法，海马损伤明显，可显示记忆功能减退；

小鼠全脑缺血/再灌注模型——用于筛选脑活性保护成分或缺血性保护剂的研究；

局灶性脑缺血——栓塞法，适用于血栓形成过程研究及溶栓治疗观察，该方法可选材料多样，能较好模拟脑栓塞；

局灶性脑缺血——线栓法，急慢性局灶性缺血模型，模拟人类缺血性脑血管病的永jiu性及暂时性局灶性缺血的各种状态，较适合再灌注作用及相关药物疗效的探究；

局灶性脑缺血——光栓法，适合慢性脑缺血研究，抗血小板、抗血栓等药物及内皮细胞保护等方面的探究，该手术方法创伤小，动物可长时间存活，血栓形成过程与人类相似并且可选择皮层梗死位置；

局灶性脑缺血——开颅法，适用于脑缺血后长期神经功能缺损及介入治疗和康复的研究，此模型以大脑皮层、尾状核缺血最明显。

Q2：小鼠线栓造模选择什么规格的尼龙线？

A2：可以参考如下瑞沃德售卖的尼龙线规格

Q3：光栓造模光束的功率多少合适呢？

A3：

Q4：MCAO模型成功的判定标准有哪些?

A4：可使用激光散斑血流成像系统或激光多普勒血流仪进行生理学检测，血流变化率＞70%即可初步判断模型成功，同步配合神经行为评分及TTC染色综合判定。

Q5：如何提高模型的存活率呢，有什么建议呢？

A5：（1）麻醉对死亡率影响较大，推荐使用吸入麻醉；

（2）控制缺血时间，缺血时间过长将导致死亡率的上升；

（3）维持术中及术后体温，可维持正常生理体征，推荐使用体温维持仪；

（4）可使用抗生素抗感染。

Q6：大鼠内皮素脑内注射诱导的局灶性脑缺血模型的操作及坐标点位置？

A6：（1）剪去动物颅顶的毛发，正中线向左旁开 0.2 cm行纵向切口，长约 1.5 cm。剪开皮肤，分离皮下筋膜，暴露颅骨表面，将颅骨骨膜刮除，骨膜处理的好处在于能够更清楚的观察骨缝，便于定位和固定，并有助于止血；

（2）将假电极移至 Bregma 点上，然后移动假电极至所需位置，并作好标记；

（3）移开假电极，在标记处用牙科钻钻一直径 1 mm 左右的小孔，以钻透硬脑膜为度；

（4）在颅骨其他部位钻两颗眼镜螺丝，深度不能超过颅骨厚度。将假电极换成 26-gauge（6.5 号注射针）的套管，按上述定位方法，将套管通过小孔下至硬脑膜，并以此位置为起始，向腹侧深入到脑的梨状皮质内 MCA 背侧 1～2 mm。该位点的参数为 Bregma 前 0.2 mm，外侧 5.2 mm，硬脑膜下 6.1 mm，或 Bregma 后 0.3 mm，外侧 5.6 mm，硬脑膜下 7.0 mm、

（5）用牙科水泥将套管固定于螺丝和颅骨上，5%聚维酮碘消毒创面。

Q7：在实验过程中分离了颈总动脉之后发现颈外动脉和颈内动脉是一上一下的，如何分辨这两个呢？

A7：颈内动脉看似在外，它从血管分叉处延伸出一小段就有向下走的趋势，基本没有侧枝；颈外动脉看似在内，相比颈内动脉表浅，侧枝较多。

Q8：脑缺血造模之后一般可以做什么行为学呢？

A8：

Q9：TTC染色不成功有哪些原因呢？

A9：可能性较多，包括了手术、试剂、染色注意事项、反面、PBS配置等等。如遇到TTC染色不成功，可以从以上各个方面去依次排除原因。

Q10：激光散斑血流成像系统的成像范围有多大，时间大概需要多久呢？

A10：成像范围是5.7mm*7.5mm-22.5cm*30cm，成像时间为0.01s/帧，全分辨率采样速度100FPS。

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第六期直播别再错过啦

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常用的呼吸道染毒方法有暴露式气管滴注、鼻内滴注和非暴露式气管滴注。非暴露式气管滴注通过气管插管将滴注液输送到肺部,无需手术切口暴露气管,染毒剂量准确且对实验动物伤害较小。非暴露式气管滴注的方法有:盲探插管、透射光插管、使用光纤冷光源等辅助插管。

气管插管是多种动物实验基本操作之一，但由于大小鼠呼吸频率较快,口腔狭小,声门较高,即使采用光纤冷光源照明寻找气管口，依然使得医学实验中气管内插管操作具有诸多困难。

北京元森凯德生物技术有限公司开发的新型小动物可视喉镜，在镜片中设置摄像头，再将摄像头拍摄到的图像通过手柄发送给显示屏显示的过程，使得该视频喉镜可以获得更高更清晰的图像，并且通过显示器可以观察到咽喉部结构以及导管插入声门的整个过程，提高了教学、检查及动物相关插管手术的效率。

新型小动物可视喉镜有助于大鼠小鼠等喉部检查或气管插管实验操作，产品内置wifi功能，高端高清，通过前端的摄像头，在iPhone、iPad、android具备无线网络连接功能的手机上可清晰观察喉部等结构，方便进行气管插管或肺部给药，操作简单，是气管插管等实验操作中不可缺少的工具。

用户案例：广州医科大学广州霍夫曼免疫研究所、ZG中医科学院中药研究所、ZG科学院上海巴斯德研究所、北京中医药大学等

北京元森凯德生物技术有限公司

24h技术服务和销售热线：17810632981（手机号码同微信号）

公司官网：www.yskdbt.com

你在进行光纤记录实验时，是否有如下烦脑：

◆ 记录好的数据看着很杂乱，不知如何整理？

◆ 数据处理包含哪些步骤？

◆ 如何确定数据分析的baseline

◆ ΔF/F指的是什么？

◆ 信号出现了“漂白效应”怎么办？

无需困惑，对以上问题，我们最近总结了一份实操步骤，这份操作指南可帮你迅速上手数据处理

常见光纤记录数据处理过程

让我们来看一张原始数据案例图，下图显示数据整体波动过于密集，其中410nm对照通道数据不够稳定；对应事件标记（线条标记处）的peak也不是很突出，针对这种数据情况，我们立刻开始数据处理吧。

（▲本文实操分析案例图）

（*以下分析过程以瑞沃德双色多通道光纤记录系统操作界面为主要示例）

01.第 一步

我们将数据根据需要分析的时间段进行裁剪，此步骤也可跳过。

02.第二步

数据预处理。常见数据预处理过程包含平滑处理，基线矫正，运动矫正。平滑处理可以将数据中的过多杂信号去除，ZD限度的突出目标peak。如下图所示，原始数据经平滑处理后目标peak更加突出，更容易观察分析。

基线矫正多数针对的是荧光信号因长时间记录导致漂白信号逐步下降，或者光纤的自发荧光在长期记录下逐步被漂白基线逐步下降等情况。此情形的数据因为整体呈现下降趋势，不利于后续数据作图分析，所以需要进行基线矫正。如下图所示，基线矫正可以直接将下降趋势的数据通过算法拟合后恢复成平整状态。

运动矫正用于采用410nm对照通道的数据，410nm数据可以用于反应背景噪音信号，运动矫正即将410nm数据与470nm数据进行拟合，通过算法从470数据中去除410nm数据的波动，得到真实的荧光数据。当不选择运动矫正功能或者实验未记录410nm的数据，可以选择一定时间范围内的信号作为对照进行算法处理。

03.第三步

数据预处理后即可得到整体数据的ΔF/F或者Z-score，用于反应数据的波动幅度。二者采用了不同的算法，数据的呈现结果略有不同。

ΔF/F=（F-F1）/F0：

（1）当数据进行基线矫正后：

◆ 若对照选择为410，F1=fitted410，F0=median（raw data）

◆ 若对照选择非410：F1为基线矫正曲线值，F0=median（Baseline）

（2）当数据未进行基线矫正：

◆ 若数据对照为410，则F1=F0=fitted410，

◆ 若数据对照非410，则F1=F0=median（Baseline）

Z-score：

使用标准分数计算方式，即z-score=（x-mean）/std，x=ΔF/F，mean为ΔF/F的均值，std为相应标准差。

04.第四步

将荧光数据与动物行为数据同步对比，选择事件标记或者增加事件标记。

05.第五步

选择事件分析的时间区间和baseline区间，用于事件相关信号分析作图。

06.第六步

将不同组的数据进行组间对比，即可分析不同处理因素下荧光数据的差异。

通过以上步骤，原始的荧光数据就可以直接出图啦。

空军军医大学光纤记录系统培训现场

（▲瑞沃德双色多通道光纤记录系统）（▲瑞沃德双色多通道光纤记录系统）

福利时间

如果你想要体验操作

同款光纤记录系统开展实验

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即可申请免费SY哟▼

作为一线的科研人，往往都要做动物实验，有时高分科研paper也离不开动物实验的支撑。你是否还在为动物实验手术操作而犯愁：

• 给药、埋置等操作比较繁杂，稍不留意就会功亏一篑？

• 只会皮下注射，其他腹腔、鞘内、肌肉注射给药技术都没操作过？

• 颅脑损伤实验，老鼠颅骨不好固定？

• 查阅大量文献，实际手术操作还是不会做？

• 没人指导，实验一拖再拖？

「“沃”的实验」——全网最全的生命科学研究线上学习平台第三期，为大家分享实验动物手术操作方法，涵盖12种手术操作技术/4大手术操作实验/10大视频课程，带你轻松熟悉注射给药、手术埋置、颅脑/脊髓损伤和缓释泵植入等实验，加速你的实验进程，助你paper连连。

>动物注射给药技术

• 腹腔注射

• 皮下注射

• 肌肉注射

• 尾静脉注射

• 鞘内注射

>动物手术埋植实验

• 立体定位注射/插针埋置实验操作

• 电极埋植手术操作

• 给药套管埋植手术操作

• 脑组织移除及透镜植入实验操作

 >颅脑/脊髓损伤实验 

• 颅脑损伤实验操作

• 脊髓横断实验操作

>缓释泵植入实验

• 植入式缓释泵概述

• 缓释泵植入实验操作

涵盖科研基础知识、实验技能、经验总结

囊括视频课程、实验手册、SOP流程图……

“沃”的实验线上学习平台将陆续上线，包含常见疾病动物模型、实验动物手术操作、实验动物行为评估、神经信号研究、细胞与分子研究……陪你走过整个学期，一站式助你提升科研技能

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//什么是气管插管？为什么要进行气管插管？

气管插管（以下简称插管）是指将一特制的气管内导管经声门置入气管，进而打开病患呼吸道，为气道通畅、通气供氧、呼吸道吸引和防止误吸等提供ZJ条件。插管是实施危重病患抢救过程中的一项重要技术，也是实施吸入麻醉的基础操作。

气管插管的主要作用：

◆ 保持气道通畅：防止口腔分泌物和胃内容物被误吸。

◆ 通气供氧：良好的氧气供应和辅助通气有助于机体的组织氧供，可以有效预防并发症出现，并在术中出现紧急情况时及时进行急救。

◆ 控制麻醉深度：相比于注射麻醉和面罩吸入麻醉，经气管插管可以有效地控制通气从而控制麻醉深度；同时插管可以防止麻醉气体向周围环境的逸散，保护手术人员不会较多地吸入麻醉药。减少麻醉气体的浪费，更经济。

//最常用的犬猫气管导管-Murphy型

①接头-连接麻醉机供气系统；②导管；③套囊-密闭气道、避免误吸、固定导管、保护气管（保持导管位于气道ZY，避免JD损伤气道）；④测试球囊-给套囊充气，可判断充气是否合适；⑤充气连接管；⑥Murphy孔-可以防止导管JD意外贴于气管壁时发生通气堵塞；⑦JD。导管外壁标识，ID为导管内径（mm）；OD示值为导管外径（mm）；刻度（cm）10、12、14、16、18…表示导管JD到刻度的距离，提示导管插入深度。

//如何选择合适的气管插管？

◆ 根据动物的体重选择对应规格的气管导管：

▲Tip：体重非常小的动物，管径选择1.5, 2.0, 2.5mmID；特定品种不适用，短头品种一般气管较细，需要的型号较小；长吻犬的气管较粗，需要的型号大。所以临床应用还要结合体型、品种等因素综合评估。

◆ 对比动物的鼻中隔：将气管导管JD抵于动物鼻中隔处，选择外径和鼻中隔宽度相当气管导管，同时另取前后两个ID（一大一小）的气管导管备用。

▲Tip：兽医还是要在具体操作的过程中根据实际情况做调整。

//气管插管前需要做哪些准备？

◆ 润滑剂或局麻剂：利多卡因凝胶

◆ 3种型号的气管插管

◆ 纱布若干

◆ 无针头注射器&套囊压力计

◆ 喉镜，确认光源没问题

//如何进行气管插管？

划ZD：气管插管操作

◆ 选择合适的气管导管（见前文）

◆ 检查气管插管套囊有无漏气：用注射器针管通过测试球囊向套囊注射空气使套囊充盈，按压套囊，套囊漏气则废弃，不漏气的可准备实施气管插管。

◆ 修剪插管为合适长度：比对犬齿到肩胛骨中前缘（第2-3肋骨处）的距离，拔掉接口，修剪插管为合适长度，重新连接接口即可。

◆ 导管壁涂利多卡因凝胶(必要时可将利多卡因气雾剂喷于喉头)，以减少喉痉挛

◆ 保持下颌与颈成一条直线，开口，拽出舌头

◆ 配合喉镜，将插管经声门裂插入气管

◆ 套囊适度充气，用套囊压力计量取压力在20 cmH2O；如无套囊压力计，则使用注射器充盈到合适压力，如下图：

◆ 确认插管正确插入：①导管插入气管内 ②导管插入深度合适 ③气道密闭

1. 直视法：看到插管位于气管内；

2. 呼吸袋、气道压力表、呼吸活瓣伴随动物呼吸或人为按压胸廓有同步变化

3. 透明管上可以看到呼出的雾气；

4. 触诊颈部只能摸到一个刚性管状结构；

5. 正压通气时可听诊肺音，可看到胸壁膨胀；

6. 通过呼气末CO2数值及波形图进行判断

◆ 固定插管，连接麻醉机

//拔气管插管的时机

以上是气管插管基本的介绍，get 更多常用气管插管产品信息，欢迎识别下方二维码咨询。

动物行为学实验可以客观性、科学性评价动物的沟通行为、社交行为、学习行为和探索行为等，它可以帮助科研人员探索认知、情绪和运动等复杂的生命现象，将其实验结果类比和推演到人，研究其行为信息的生理和病理意义。但在实验过程中，总会遇到一些大大小小的问题

• 动物行为学实验种类很多，不知道用哪种研究手段？

• 做旷场、高架十字迷宫等实验时，不清楚有哪些注意事项？

• 在做行为学实验数据分析时，哪些数据有用、如何处理数据来支撑自己的研究？

“沃”的实验

全网最全的生命科学研究线上学习平台

第四期内容：

实验动物行为评估

带你get动物行为学实验的研究方法

「“沃”的实验」——全网最全的生命科学研究线上学习平台第四期，为大家分享实验动物行为评估方法，囊括学习记忆检测、运动检测、抑郁检测、焦虑检测、疼痛检测和行为学分析方法，3位老师线上为你详解超20种动物行为学实验方法，助你轻松完成动物行为学实验，从而提高研究效率与质量。

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►学习记忆检测

• 奖赏相关行为学实验

• 自发活动相关行为学实验

• 惩罚相关行为学实验

►运动检测

• 损伤评估行为学实验

• 耐力评估行为学实验

• 协调评估行为学实验

► 抑郁检测

• 习得性无助实验介绍

• 悬尾实验介绍

• 强迫游泳实验介绍

• 糖水偏好实验介绍

• 旷场实验介绍

• 新奇物体探索实验介绍

• 新奇抑制摄食实验介绍

►焦虑检测

• 高架十字迷宫实验介绍

• O迷宫实验介绍

• 黑白箱实验介绍

• 饮水焦虑实验介绍

• 旷场实验介绍

• 新奇抑制摄食实验介绍

► 疼痛检测

• 疼痛分类及神经通路

• 机械刺痛检测方法

• 热刺痛检测方法

• 自发疼痛检测方法

►行为学分析方法

以西班牙Panlab公司的行为学视频记录分析软件Smart v3.0为例，介绍Smart v3.0软件分析旷场实验视频的操作过程，以及演示Smart v3.0软件的特色功能

欢迎大家收藏「“沃”的实验」线上学习平台

平台中的内容将持续更新

下期内容预告：

神经信号研究-调控与检测方法

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实验动物该怎么选择？

不同脑缺血模型，弄不清对应构建方法？

常用的血流监测技术，你都掌握了吗？

「全线赋能·“沃”的实验」之实验方法实战教程

直播第五期为大家聚焦

《脑缺血模型构建及检测》

从实验动物的选择、不同模型的分类

各个模型的构建方法到血流监测技术

两位老师将进行综合详细的讲解

全面助力你的科研实验研究

直播时间

6月21日（周二）19：00

报名方式

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主题：脑缺血模型构建

• 脑缺血研究背景

• 脑缺血动物模型构建

• 脑缺血模型构建实验仪器

讲师：孙绍强

瑞沃德行业解决方案专家，在膜片钳/钙成像/干细胞诱导方面有着丰富的实验经验，曾参与多项重大研发及自然科学基金项目，曾在Cell Stem Cell 上发表论文，专注于神经疾病，脑缺血及神经退行性疾病模型制备和机制研究，已为上百家客户提供专业的神经疾病整体解决方案。

主题：脑卒中研究中的血流监测技术

• 激光多普勒

• 激光散斑

• 超声多普勒

• 核磁共振成像

• 双光子显微镜

讲师：殷维君

瑞沃德微循环监测解决方案专家，在生理信号监测和血流血氧成像领域拥有丰富的经验，主导动物活体成像解决方案的设计及优化，专注于临床及临床前微循环监测解决方案的构建。

上期直播间互动问题

这次我们全部为小伙伴解答

Q1：组织剪切的大小有没有具体要求，肿瘤组织一般2-4mm可以吗？

A1：这要根据组织类型去判断，一般会预处理成10mm左右的组织块，太大可能会导致处理不完全，太小可能导致细胞死亡增加，甚至导致样本变稠等。

Q2：细胞活率80%就可以了吗，看到一些资料写的都要90%以上。

A2：这个需要根据下游实验的需求灵活调整，如果样本存活率不能达到要求的话，除了优化实验条件以外，还可以通过一些死细胞去除的试剂来优化已获得的样本。

Q3：低温解离细胞与常规的37度制备单细胞优势分别是什么？区别是什么？

A3：37℃条件下进行组织解离，由于细胞转录活跃，因此解离过程中基因表达可能会发生改变，可能会干扰应激反应相关基因表达，所以在进行snRNA-seq时可以通过使用冷活性酶释放细胞核，同时一些热敏感或者脆弱的细胞更适合采用低温解离的分离方式，但是低温条件对一些质密难解离的组织的处理效率可能会降低。

另外，温度对不同细胞种类也有一定影响，比如在进行脑组织解离时，热解离可能会影响神经元和星形胶质细胞的获取，但是会大量富集小胶质细胞，所以在进行组织解离时，根据获得目的细胞的需求要灵活调整解离方案。

Q4：裂红处理有什么注意事项吗？

A4：如果直径6-8μm的细胞占比较高，且有核率偏低，这表明红细胞含量可能较多，需要进行红细胞裂解，如果红细胞裂解依然不干净，不建议增大裂解体系，建议适当延长裂红时间，或适当增加裂红次数。

Q5：流式染色时间及温度如何选择？

A5：染色本身取决于抗体抗原之间的结合能力，染色时间和温度，受限于抗体浓度，一般根据选择抗体的说明书推荐的浓度和孵育时间、温度选择。我的实践经验：当不清楚说明书的情况，我会选择室温染色12-15min（取决于抗体浓度微调），或4度冰上30min。注意染色时间尽量不要让细胞破损，否则死细胞碎片会影响流式结果。此外细胞消化完毕后应该尽快染色处理，特别是一些凋亡染色、胞内酶染色为保持细胞物质活性，应尽快染色。

Q6：请问流式细胞实验中单抗进行荧光需要什么样的对照？

A6：关于对照设置，这个比较复杂，一般我们是选择同型对照作为阴性对照组，得到的结果往往是比较好的。所谓的同型对照就是同种属同亚型、相同荧光标记物、使用剂量和浓度相同，且属于非特异性结合的抗体为同型对照组。通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 

还有一类就是最常见的纯阴性对照，检测细胞群不进行任何抗体处理，直接进行流式检测，这就是简单消除细胞和溶剂本身的影响，这种方法的好处是节约抗体，毕竟抗体很贵。

Q7：如何减少补偿的干扰？

A7：补偿干扰往往是多激光的流式仪器才会发生一定干扰情况，此时，可以根据抗体公司提供的染料搭配方案选择比较好，也就是发射光谱的波长峰尽量不重叠的染料，这样补偿干扰会尽量消除。因此，往往需要查看染料的波长范围，此外，对于4色以上的多色标记情况，一般不常见，此时往往染料的波长范围难以避免的重叠，这时候，推荐使用抗体公司推荐的配色方案，尽量避免发射光谱的重叠。此外很多流式仪器配套软件都带一定算法对补偿进行修正，可以适当修正这个影响。

Q8：细胞自发荧光如何解决？

A8：细胞自发荧光往往是细胞内物质带有荧光，植物细胞因为叶绿素原因会自带一定荧光，然后一些药物处理下，药物本身带有发色基团，也可能自荧光，此时，纯阴性对照的设置可以补偿一定的情况。然后就是染料的选择情况，染料荧光波长范围避免与细胞自发荧光的波长的重叠，这样会比较好一些。我之前做药物的细胞凋亡实验时候，考虑到药物的情况，就没有使用常见的凋亡检测的Annexin V染料，而改用Annexin V-APC 。尽量设置纯阴性对照、有条件做下同型对照，往往可以在数据处理时候适当减少部分因素的影响。这样流式的结果会更好。

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盛瀚色谱讲堂开课啦！

今天下午14:00正式开播，无需下载软件，长按识别下方二维码进入直播间直接观看！

电脑端可复制链接到浏览器观看：https://vzan.com/live/tvchat-676717937?v=0.5792623209319101

本期内容

1. 无氘代溶剂（NoD）实验基础介绍：为何要做NoD实验，NoD与含有氘代溶剂实验的区别，NoD的实验要求等。2. NoD实验测定：方法设定，脉冲参数设置以及谱图处理等。

直播时间： 2020年11月26日（周四） 上午10:00~11:00

观看方式：1. 手机版微信端（推荐）：识别图中小程序二维码，进入直播间

2. 网页端：复制下面链接在浏览器中打开

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（首次进入直播间需输入密码：jeol2020）

测试需求：

调制解调是非常重要的通信技术，也是通信原理课程中必须掌握的知识点，调制解调实验更是通信类实验中的必做实验。调制解调实验主要目的是让学生理解调制解调的工作原理，通过使用测量仪器（比如示波器）观测调制解调电路输出的各类信号波形（包括：载波，调制波，已调波，解调后的波形）并进行必要的测量，学生可以直观的掌握调制解调的原理。目前高校基础实验室中较为常见的是双通道示波器，对于调制解调电路信号不能在一次测量中全部观测到，普源示波器 DS1000Z系列四通道可以很好的满足此类测试需求，如下图所示，示波器可以在同一屏幕上观测载波，调制波，已调波，以及解调后的波形。

测试方案：

教学实用功能：

自动测量——专用测量键

普源示波器DS1000Z提供24种自动测量参数，所有参数可通过面板左侧的专用测量菜单键一键调出。

自动测量——参数图标

每个测量参数都有参数示意图标，显示每个测量项目测量的是波形的什么参数，且图标的颜色会根据测量信源的选择自动调整颜色，让学生更直观的理解测量参数的意义。

自动测量——自动光标

自动光标会标记出当前所选测量项对应的波形参数位置，图像化方式有助于学生理解测量结果。

AUTO键锁定

教师可以锁定示波器上面板上的Auto按键，禁用自动设置示波器的功能，让学生更多的亲手设置示波器的垂直、水平、触发等参数，得到正确稳定的波形显示。按示波器面板上的【Utility】键，进入“Auto选项”菜单，按下“锁定”键即可锁定按键，如需解锁，需要发送远程命令“:SYSTem:AUToscale1”解锁。

一键截图

学生可以方便的把实验过程中示波器的屏幕图像拷贝到U盘中，方便课后的分析和填写实验报告。将U盘插入示波器前面板的USB接口，然后按面板右侧的打印键，即可将当期屏幕图像保存到U盘中。

设备选型方案

如需了解更多测试方案或者产品，欢迎访问安泰测试网。

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直播时间

4月19日（周二）19:00

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4月19日，19：00

我们直播间见

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各位小伙伴们，好久不见呀~~

春节长假在我们恋恋不舍的目光中绝尘而去！！

当时的“节后再说”有多爽

现在的开工就有多吐血

面对那一茬接一茬的实验

和一脸呆萌的自己，是不是很崩溃？

别担心~~

贴心的小沃已经准备好复工礼包

本次小沃为你准备了5本动物手术造模手册，无论你是想找神经系统、还是心血管疾病、亦或是肿瘤疾病造模实验方案，这里统统都有，一次性全面系统帮你解答手术实验疑难点。

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01

神经系统研究

神经系统研究手术与造模大全囊括了神经科学领域最常使用的动物实验操作技术以及动物模型构建的方法，具体内容包括相关疾病的研究背景、模型构建的操作和评估方法以及参考文献，为您提供规范的实验操作流程和更多的模型选择，提高实验的成功率和可重复性，助您实验顺利开展。

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心脑血管疾病研究

本手册详细介绍四大疾病模型，包括高血压、脑卒中、动脉粥样硬化、下肢缺血动物疾病模型，构建方法多达17种，助你开拓科研新思路！

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这本手册涵盖7大肿瘤疾病模型和15种构建方法，概述了不同模型应用场景、优缺点、使用时应考虑的因素等内容，为您提供更多的动物模型参考和更适合的模型选择。

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该手册涵盖常见的脂肪肝模型、1型和2型糖尿病模型、肥胖疾病模型的构建与评估方法；详细介绍了不同模型的应用场景、优缺点、使用时应考虑的因素等内容，助你快速找到合适的代谢类实验模型！

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人类的悲欢并不相通

实验小白的“忧桑”无人能懂

辛苦找文献，查文献，看文献

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实验一来两眼空

文献方法笼统太粗略

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