DNA合成反转录的作用和过程
反转录是指在基因工程进行过程中,将RNA作为模板,将DNA遗传信息提取出来的过程。对于DNA生物合成而言,反转录是一种特殊的方式。将RNA作为模板,利用反转录酶,合成DNA的过程,即是反转录。
意义
反转录的发现无论是理论意义还是实践意义均非常的重要。
1、癌基因通过对致癌病毒的研究被发现了,与病毒癌基因相同的碱基序列也在如膀胱癌、小细胞肺癌等人类的一些癌细胞中被分离出来,叫做原癌基因或细胞癌基。癌基因的发现提供了很有前途的线索,有助于肿瘤发病机理的研究。
2、在实际工作中,为基因工程的实施提供了帮助。因为很容易制备目的基因的转录产物,所以为了获得目的基因,能够通过反向转录mRNA,来使得DNA形成。
3、修正和补充了分子生物学的ZX法则,以下为修正后的ZX法则:DNA将遗传信息传递给RNA,RNA再将遗传信息传递给蛋白质,如此,就将遗传信息的转录和翻译的过程完成了。DNA将遗传信息传递给DNA也行,如此,即是将DNA的复制过程完成了。以上就是任何有细胞结构的生物都必须遵循的法则。如阮病毒,即疯牛病病毒的一些病毒是通过蛋白质直接使得蛋白质形成,某些病毒可以利用RNA作为模板逆转录使得DNA形成,RNA在如烟草花叶病毒等一些病毒中能够自我复制。
反转录过程
将所需要的目的基因的信使RNA人为地提取出来,并且将其作为模板,使DNA人工合成。引物使用tRNA(主要是色氨酸tRNA),模板使用RNA,底物使用dNTP,沿着5′→3′方向,在tRNA3′桹H末端上,使得一条与RNA模板互补的DNA单链合成,此条DNA单链称为互补DNA(complementary DNA, cDNA),RNADNA杂交体即是由它与RNA模板形成。然后在反转录酶的作用下,将RNA链水解掉,模板再利用cDNA,来使得第二条DNA链合成,到现在,使得由RNA指导的DNA合成过程完成了。
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