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　　ELISA实验原理：ELISA的原理、类型及操作步骤

　　ELISA的原理

　　ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。

　　ELISA方法类型和操作步骤

　　elisa可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

　　(一)双抗体夹心法

　　双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：

　　(1)将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。

　　(2)加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。

　　(3)加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。

　　(4)加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。

　　根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。

　　(二)双位点一步法

　　在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。

　　在一步法测定中，应注意钩状效应(hookeffect)，类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。

　　(三)间接法测抗体

　　间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下：

　　(1)将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。

　　(2)加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。

　　(3)加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体间接dibiao记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。

　　(4)加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。

　　本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。

　　(四)竞争法

　　竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下：

　　(1)将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤。

　　(2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原，则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原，则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合，竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会，使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原，保温后，酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。

　　(3)加底物显色：参考管中由于结合的酶标抗原最多，故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。

　　(五)捕获法测IgM抗体

　　血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗本多用捕获法，先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下：

　　(1)将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM。洗涤。

　　(2)加入稀释的血清标本：保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。

　　(3)加入特异性抗原试剂：它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。

　　(4)加入针对特异性的酶标抗体：使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。

　　(5)加底物显色：如有颜色显示，则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在，是为阳性反应。

　　(六)应用亲和素和生物素的ELISA

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蛋白质是生物体的基本组成部分，参与各种生物过程。为了更好地理解和操控这些过程，科学家们开发了多种技术来分离和纯化蛋白质。其中，标签蛋白沉淀技术是一种非常有效的方法，它通过将特定的标签连接到目标蛋白上，利用标签的特性将其与其他蛋白分离开来。这项技术的优点在于其高特异性和高纯度，使得研究人员能够获得高质量的蛋白质样品，以进行进一步的分析和研究。在生物科学领域，标签蛋白沉淀技术已成为一项关键技术，它有助于我们更好地理解生命的基本过程以及开发新的治-疗方法。标签蛋白沉淀技术步骤：

①这一技术的核心在于对目标蛋白进行巧妙的改造。我们通过在蛋白编码序列中嵌入特定的标签或标记（例如谷胱甘肽S-转移酶，His标签，FLAG标签等），使目标蛋白在表达时能与标签紧密结合。

②我们将携带标签蛋白编码序列的表达载体导入适合的宿主细胞。在适当的培养条件下，宿主细胞高效地表达出目标蛋白。随后，通过细胞破碎技术释放出蛋白质。

③核心环节——沉淀。利用标签与亲和配体间的特异性结合力，我们使用具有亲和性的树脂、磁珠或柱子将目标蛋白从混合物中分离出来。不同标签有其独特的亲和性，确保了蛋白的高纯度分离。

④在成功沉淀目标蛋白后，我们通过洗涤步骤去除其他杂质和未结合的蛋白。最-后，只需特定的洗脱条件，目标蛋白便能从亲和树脂上完全洗脱下来。

⑤经过这一系列步骤，我们获得的蛋白纯净度极高，可进行各种后续分析，如SDS-PAGE、质谱等。而这些高纯度蛋白在科学实验、药物研发、生物工程等领域具有广泛的应用前景。

值得注意的是，选择合适的标签和亲和树脂是这项技术的关键。同时，标签的引入可能会对蛋白的结构和功能产生影响，因此在实验设计时必须慎重考虑。

总的来说，标签蛋白沉淀技术以其精-准、高效的特性，为蛋白质研究领域带来了革命性的突破。随着科学技术的不断进步，我们有理由相信这一技术将继续为生命科学领域带来更多突破性的发现。

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快蒸发有两个方法：加强它周围的空气流动和它的温度。氮气还是一种不活泼的气体全自动氮吹仪，也能起到隔绝氧气的作用，防止氧化。氮吹仪就是通过这些原理达到了浓缩的目的。它将氮气快速、连续、可控地吹到加热样品表面，实现大量样品的快速浓缩。

全自动氮吹仪以下方式进行清洗维护

1、加热介质：使用蒸馏水和去离子水，这将防止在水浴壁上产生水垢。注意不要使用有机溶剂作加热介质。

2、除藻剂：不加热时，在水浴的水中加以除藻剂，可防止生物污染。不应使用酸性除藻剂，并应确保所用除藻剂不会影响所要处理的样品。

3、换水：水浴中的水建议一周一换，zui长不超过一月。

4、酸性环境：当接触或暴露于酸性材料、蒸汽或样品后，应当立刻清洗，用适度的碳酸氢钠溶液或其它相似溶液中和，再用清水冲洗。长时间接触酸性物质，将会损坏仪器全自动氮吹仪。如必须长时间接触酸性物质，则应采取保护措施。

5、针头：每次使用完针后都应清洗，尽量减少针的污染。可使用有机溶剂冲洗、高压消du和索氏提取等技术。

6、浸没：浴底耐水但不防水。绝不能将水浴浸泡在任何液体中，或放置在可能发生浸泡的地方。

薄膜的种类是十分之多的，保护膜和包装膜材料就是薄膜材料的一种，这就是用专门仪器来进行测试。

保护膜按照用途可以分为数码产品保护膜，汽车保护膜，家用保护膜，食品保鲜保护膜等，保护贴的特点是本身质感柔软，且粘贴方便，但是这种材质比较厚，透光度不好，使屏幕看起来比较朦胧。

包装膜主要由几种不同牌号的聚乙烯树脂混合挤出而成，具有抗穿刺，对堆放在托板上的货物进行缠绕包装，使包装物更加稳固整洁，更防水作用，被广泛使用。

赛成仪器自主研发生产的XLW-H拉力机，搭配0.5级非常高精度进口传感器，是一款专业用于测试各种软包装材料拉伸性能等力学特性的电子拉力试验机。

设备适用于塑料薄膜、复合材料、软质包装材料、塑料软管、胶粘剂、胶粘带、 不干胶、医用贴剂、保护膜、组合盖、隔膜、无纺布、橡胶等材料的力学性能检测，拉力机可进行拉伸、剥离、变形、撕裂、热封、穿刺力、开启力、低速解卷力、拨开力等项目检测。

产品特征

10寸超大触摸屏，人机接口时尚、便捷

多种试验项目选择，满足绝大多数行业应用

高精度进口传感器，测力系统精度高，重复性好，传感器超量程保护

准确滚珠丝杠多轴定位技术，可实现无级调速功能，运动驱动系统平稳且运行精度高

运动机构限位保护、过载保护、自动回位以及掉电记忆等智能配置，保证用户与仪器本身的安全

开机自动零点校准，支持手动传感器清零

气动夹持试样，减少操作时间，操作体验更流畅

试验曲线实时展示试验过程中力值的变化趋势，可进行试验结果的单次、成组的统计分析

微型打印机，便条随时打印试验统计结果

设有标准的USB通信接口

专门的计算机通信软件，可进行试验的实时显示及数据的分析处理 、数据保存

符合GMP用户多级权限，测试数据历史记录可查询，数据不可更改，可审计追踪

测试步骤

步骤一、先安装好拉伸夹具。

步骤二、将薄膜样品夹持到夹具的中间，必须夹紧。

步骤三、电脑软件设置好拉伸的速度、停机大力值范围等参数。

步骤四、点击开始试验、等塑料薄膜被拉断试验机停止工作。

步骤五、保存好试验数据或打印数据供生产参考使用。

济南赛成仪器一直致力于为大部分国家客户提供高性价比的整体解决方案，公司的核心宗旨就是持续创新，打造高精尖检测仪器，满足行业内不同客户的品控需求，期待与行业内的企事业单位增进交流和合作。

赛成仪器，赛出品质，成就未来！

偏光应力仪，又称偏光应力测试仪、台式应力仪，有定性和定量两种测量模式，偏光应力仪的工作原理主要是基于应力双折射检测。由于玻璃是各向同性体，各方向的折射率相同。如果玻璃中存在应力，各向同性的性质会受到破坏，引起折射率的变化，两个主应力方向的折射率不再相同，会出现双折射现象。

双折射导致材料产生光学相位延迟，其相位延迟值与应力值的关系由下式确定：C为应力光学常数，它是物性常数，仅与玻璃品种有关。只要能测量出相位延迟值，就可以知道材料的内部应力。并且，绝大多数偏光应力仪给出的量值就是相位延迟值。

偏光应力仪常用于制药企业、光学仪器厂、玻璃制品厂、实验室作测量光学玻璃、玻璃制品及其它光学材料的应力值。

内应力值的大小对药用玻璃瓶的质量起着决定性作用，这主要由瓶子在烧制过程中的退火工艺决定。一旦药用玻璃瓶如输液瓶等因内应力的不达标，导致玻璃瓶的机械强度和热稳定性等性能降低，便大大增加了瓶子在运输、高温消毒灭菌、药品灌装以及存放等过程中的破损几率。因此，生产企业做好内应力的检验工作，不仅能有效控制瓶子的质量，还是用于监督和控制退火工艺制度的有效手段。

1、执行标准

GB/T12415《药用玻璃容器内应力检验方法》

2、检测仪器

济南赛成自主研发YLY-H智能偏光应力仪适用于制药企业、玻璃制品厂、实验室做测量光学玻璃、玻璃制品及其它光学材料的应力值，仪器可定性和定量测试玻璃内应力，彩色液晶屏自动读取结果。现已满足和符合多项国家和国际标准：GB/T4545 《玻璃瓶罐内应力检验方法》、GB/T12415《药用玻璃容器内应力检验方法》YBB00162003-2015《内应力测定法》。

3·1、对药用玻璃瓶底部的测试

（1）将灵敏色片取下，将四分之一波片置入视场，调整偏光应力仪零点，使之呈暗视场。

（2）把试样放入视场，从口部观察底部，这时视场中会出现暗十字，如果试样应力小，则这个暗十字便会模糊不清。

（3）旋转检偏镜，使暗十字分离成两个沿相反方向移动的圆弧，随着暗区的外移，在圆弧的凹侧便出现蓝灰色，凸侧便出现褐色。如测定某选定点的应力值，则旋转检偏镜直至该点蓝灰色刚好被褐色取代为止。

（4）绕轴线旋转供试品，找出zui大应力点，旋转检偏镜，直至蓝灰色被褐色取代

（5）记录此时的检偏镜旋转角度，并测量该点的厚度。

3·2、对药用玻璃瓶瓶壁的测试

（1）步骤同上述3·1。

（2）把试样放入视场中，使试样的轴线与偏振平面成45o，这时侧壁上出现亮暗不同的区域。

（3）旋转检偏镜直至侧壁上暗区聚会，刚好完全取代亮区为止。

（4）绕轴线旋转供试品，借以确定zui大应力区。

（5）记录测得zui大应力区的检偏镜放置角度，并用CHY-G 电子壁厚底厚测试仪分别测量两侧壁原的厚度(记录两侧壁壁厚之和)。

济南赛成仪器一直致力于为大部分国家客户提供高性价比的整体解决方案，公司的核心宗旨就是持续创新，打造高精尖检测仪器，满足行业内不同客户的品控需求，期待与行业内的企事业单位增进交流和合作。

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　　实验室组织类样品在进行研磨前处理时，往往要将样品分成少量多批次，这样可以尽可能地满足实验检测要求，提高实验效率。为达到这样的效果，我们需要用到多样品组织研磨机。

　　多样品组织研磨机是高通量组织研磨仪搭配研磨适配器组成的，原本搭载的两个球磨罐，替换成了可装载多个离心管的研磨适配器，以实现少量多批次研磨的目标。

　　多样品组织研磨机操作步骤：

　　1、将简单处理的组织样品和适量研磨球放入离心管中，然后将装好样品的离心管放入研磨适配器中。

　　2、如果样品需要低温研磨，可先将装有样品的适配器放入液氮罐中冷冻降温，几分钟后取出。

　　3、将冷冻后的研磨适配器放在夹具中间，调整位置后利用自动中心定位的紧固装置和安全锁紧装置进行固定。

　　4、盖上设备仓盖，通过液晶触摸屏设置振动频率、振动时间。

　　5、启动设备，开始对样品进行破碎研磨，可从观察窗观察研磨平台运行情况。

　　6、等待研磨完成，打开仓盖，取出样品，关闭设备。

　　多样品组织研磨机工作原理：

　　多样品组织研磨机本质上是二维振动球磨机，其工作区域有两个摇臂，运行时会做高频次的“∞”形横向水平摆动，高速运动的摇臂会带动研磨罐及罐内研磨球，赋予其动能，研磨球对样品进行撞击、挤压和摩擦，实现样品的精细研磨。

　　相比于常规型号的设备，多样品组织研磨机用研磨适配器替换了研磨罐，从而可以装填更多样品。研磨适配器是类似于离心管架的容器，内部可以放置多个离心管，离心管内部可以放置样品及研磨球。设备运行时，离心管内的研磨球对样品进行撞击、摩擦和挤压，完成样品的精细研磨。

　　以上就是对多样品组织研磨机的工作原理和操作使用步骤的介绍，多样品组织研磨机对于动物、植物组织样品研磨、生物细胞破壁、DNA/RNA提取都有良好的处理效果，应用领域涵盖农业、食品、生物、环境等多个行业。